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1、目的:觀察脂多糖(LPS)刺激人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分泌單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP)-1的水平,并探討肝素對(duì)其表達(dá)的影響。
方法:體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株(HUVEC)至第4~5代用于實(shí)驗(yàn)。將細(xì)胞分成對(duì)照組、LPS刺激組、普通肝素+LPS組及普通肝素組。對(duì)照組加入磷酸鹽緩沖液(PBS)10μg/ml;LPS刺激組加入LPS10μg/ml;普通肝素+LPS組于LPS刺激前15min加入10 U/ml的普通肝素;普通肝素組加入10 U/
2、ml的普通肝素。各組于LPS刺激后6h、12h收集細(xì)胞提取總RNA,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qRT-PCR)方法測(cè)定各組細(xì)胞中MCP-1的mRNA相對(duì)表達(dá)量。
結(jié)果:與對(duì)照組(6h:1.00±1.33,12h:1.00±1.66)相比,LPS刺激組的MCP-1表達(dá)水平明顯增加(6h:16.41±1.83,12h:9.27±1.49)(P<0.05),6h達(dá)高峰,隨后逐漸下降,但12h仍明顯高于對(duì)照組。與LPS組
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