單核細胞向淋巴管內(nèi)皮細胞的誘導(dǎo)分化.pdf

1、淋巴管新生通常發(fā)生在腫瘤、創(chuàng)傷、炎癥等許多疾病的病理生理過程中。以往的研究認(rèn)為，淋巴管新生的途徑主要有二：原有的淋巴管在VEGF—C的作用下以出芽方式形成新的淋巴管[1]；外周血內(nèi)皮祖細胞遷移到局部組織，在VEGF—C的誘導(dǎo)下轉(zhuǎn)分化為淋巴管內(nèi)皮細胞[2—3]。在腫瘤、創(chuàng)傷、炎癥等病理情況下，單核細胞通過血液循環(huán)遷移至局部組織轉(zhuǎn)化為巨噬細胞，通過產(chǎn)生VEGF—C，對淋巴管新生發(fā)揮重要作用[4—5]。目前研究已發(fā)現(xiàn)，單核細胞在VEGF等的作

2、用下能夠向血管內(nèi)皮細胞轉(zhuǎn)分化[6]，但能否在某些因子的誘導(dǎo)下轉(zhuǎn)分化為淋巴管內(nèi)皮細胞，尚未見體外研究證實。本研究選擇在炎癥等病理狀態(tài)下組織產(chǎn)生的能活化單核細胞的因子，如：細胞外基質(zhì)成分纖維連接蛋白（fibronectin，F(xiàn)N）、炎性因子脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）和腫瘤壞死因子—α（tumor necrosis factor—α，TNF—α）以及血管內(nèi)皮生長因子C（vascular endothelial gr

3、owth factor—C，VEGF—C）、白細胞介素—3（interleukin—3，IL—3）、白細胞介素—7（interleukin—7，IL—7）等，體外誘導(dǎo)單核細胞，檢測其淋巴管內(nèi)皮細胞標(biāo)志物L(fēng)YVE—1、Podoplanin、Prox1及內(nèi)皮細胞標(biāo)志物vWF和eNOS的表達，觀察其向淋巴管內(nèi)皮細胞轉(zhuǎn)分化的可能性，為進一步研究淋巴管新生機理提供理論依據(jù)。 目的：淋巴管生成存在于腫瘤、炎癥等許多疾病的病理生理過程中。本研

4、究旨在探討單核—巨噬細胞在炎癥等病理環(huán)境中轉(zhuǎn)分化成淋巴管內(nèi)皮細胞的可能性。 方法：取成人新鮮外周血，分離單核細胞，用內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基ECM培養(yǎng)，分別在FN鋪板或VEGF—C、TNF—α、LPS、IL—3、IL—7刺激下誘導(dǎo)培養(yǎng)24 h或6d，用RT—PCR和免疫細胞化學(xué)法，檢測單核—巨噬細胞對淋巴管內(nèi)皮細胞特異性標(biāo)志物L(fēng)YVE—1、Podoplanin、Prox1以及內(nèi)皮細胞共同標(biāo)志物vWF、eNOS的基因和蛋白表達。 結(jié)