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1、第一部分 淋巴管內(nèi)皮細胞的體外培養(yǎng)及其形態(tài)學(xué)觀察 目的:在體外培養(yǎng)淋巴管內(nèi)皮細胞,觀察其生長過程和方式、形態(tài)結(jié)構(gòu)及某些生物學(xué)特性.同時尋找一種既適于淋巴管內(nèi)皮細胞生長又適于某些腫瘤細胞生長的共同培養(yǎng)基,以方便進行腫瘤細胞和淋巴管內(nèi)皮相互作用的研究.1.用保留大組織塊的方法,能防止胸導(dǎo)管側(cè)漏和減少污染,加快淋巴管內(nèi)皮細胞的取材速度和成功率.2.淋巴管內(nèi)皮細胞在體外培養(yǎng)中仍具有維持體內(nèi)的一些形態(tài)學(xué)及生物學(xué)特性的能力.3.淋巴管內(nèi)皮細胞在DM
2、EM中培養(yǎng)成活,使體外研究淋巴管內(nèi)皮細胞與腫瘤細胞之間的作用成為可能.第二部分 M-21黑色素瘤與淋巴管內(nèi)皮細胞相互作用的形態(tài)學(xué)觀察 觀察M-21黑色素瘤細胞和淋巴管內(nèi)皮細胞聯(lián)合培養(yǎng)時兩者之間的作用,探討腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移的過程和機理.1.體外聯(lián)合培養(yǎng)的方法可以顯示、觀察腫瘤細胞與淋巴管內(nèi)皮的作用過程.2.腫瘤細胞穿越淋巴管內(nèi)皮的過程包括粘附、浸潤和遷移.3.腫瘤細胞多粘附在LECs連接處,也可以粘附于單個內(nèi)皮細胞上面.4.腫瘤細胞可通過內(nèi)皮
3、細胞之間的間隙發(fā)生轉(zhuǎn)移(LECs保持完整),也可直接破壞LECs,形成"窗口"樣通道發(fā)生轉(zhuǎn)移(LECs被破壞).第三部分 腫瘤細胞與淋巴管內(nèi)皮細胞粘附的定量研究 目的:不同腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移能力和轉(zhuǎn)移方式主要與腫瘤細胞和內(nèi)皮細胞的粘附及浸潤有關(guān).用體外粘附分析方法檢測腫瘤細胞與淋巴管內(nèi)皮細胞的粘附能力,探討不同腫瘤細胞與淋巴管內(nèi)皮細胞粘附的特點.1.腫瘤細胞和淋巴管內(nèi)皮細胞具有很強的結(jié)合力,二者之間的粘附率與聯(lián)合培養(yǎng)時間成正比;2.腫瘤細胞
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