肝素對脂多糖誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的
　　 探討肝素對脂多糖誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響。
　　 方法
　　 購自中國科學(xué)院上海細(xì)胞庫人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系進(jìn)行體外培養(yǎng),培養(yǎng)代數(shù)控制在3-5代之間,于培養(yǎng)液中給予100ng/nlLPS(脂多糖)+10ug/mlCHX(放線菌酮)處理以建立細(xì)胞凋亡模型,肝素處理組于模型條件培養(yǎng)液作用半小時后分別加入不同濃度的肝素(0.01U/ml,0.1U/ml,1U/ml及10U/ml)干預(yù),共同孵育24h。光

2、鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),四甲基偶氮唑藍(lán)還原反應(yīng)(MTT法)測定細(xì)胞存活率以觀察細(xì)胞增殖變化;免疫熒光法在熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞凋亡形態(tài);Annexin V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡。
　　 結(jié)果
　　 模型組內(nèi)皮細(xì)胞凋亡率明顯高于陰性對照組,不同濃度肝素組細(xì)胞凋亡率均低于模型組,同時細(xì)胞存活率增高(P＜0.01)。
　　 結(jié)論
　　 肝素可通過抑制脂多糖誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡而保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞功能