瘦素在病理性瘢痕及瘢痕成纖維細(xì)胞中的表達(dá)與分析.pdf

1、中圖分類(lèi)號(hào)：中圖分類(lèi)號(hào)：R751.05碩士學(xué)位論文專(zhuān)業(yè)學(xué)位專(zhuān)業(yè)學(xué)位瘦素在病理性瘢痕及瘢痕成纖維細(xì)胞中的表達(dá)與分析二〇一六年三月〇一六年三月院（系）、所院（系）、所臨床醫(yī)學(xué)院研究生姓名研究生姓名杜逸鳳學(xué)科、專(zhuān)學(xué)科、專(zhuān)業(yè)皮膚病與性病學(xué)導(dǎo)師姓導(dǎo)師姓名潘寧教授西南醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文瘦素在病理性瘢痕及瘢痕成纖維細(xì)胞中的表達(dá)與分析摘要目的：探討瘦素(leptin)在病理性瘢痕(pathologicalscars)中的表達(dá)情況以及l(fā)eptin在不同

2、時(shí)間、不同濃度的人瘢痕成纖維細(xì)胞（humankeloidfibroblastsHKF）和人皮膚成纖維細(xì)胞(humanskinfibroblastsHSF)上清液中的表達(dá)情況，從而進(jìn)一步了解leptin是否參與病理性瘢痕的發(fā)生發(fā)展并為病理性瘢痕的防治提供一些新的理論思路和依據(jù)。對(duì)象與方法：1、實(shí)驗(yàn)所用標(biāo)本，包括瘢痕疙瘩、增生性瘢痕及正常皮膚組織均來(lái)源于四川省人民醫(yī)院皮膚外科與燒傷科(2015年2月至2015年11月)，分為瘢痕疙瘩組（n=

3、20）、增生性瘢痕組（n=20），正常皮膚組織組（n=10）。取材前均獲得患者知情同意。病理性瘢痕患者年齡1650歲，其中男性18例，女性22例，病程為6月至6年，且患者于術(shù)前1年內(nèi)未進(jìn)行放療、局部注射或外用防治瘢痕藥物。正常皮膚組織來(lái)源于四川省人民醫(yī)院皮膚外科植皮術(shù)取皮時(shí)多余皮膚，患者年齡1650歲。應(yīng)用免疫組織化學(xué)法（SP法），標(biāo)本經(jīng)石蠟包埋后切片3張，取第一張切片行HE染色，讀片以確定標(biāo)本為正常皮膚組織或病理性瘢痕，取第二張切片滴

4、加一抗（兔抗人leptin），而第三張切片滴加PBS作一抗陰性對(duì)照。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)按照Shimizu法[1]分析，主要依據(jù)被染色的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)以及顏色的深淺計(jì)分：陽(yáng)性細(xì)胞百分比75%為3分；未著色即為0分，著色淺（淡黃色）即為1分，著色深（棕黃色）即為2分，棕褐色即為3分。將以上兩評(píng)分相加，所得之和≤1分即為陰性()陽(yáng)性()為2～4分強(qiáng)陽(yáng)性()≥5分，～判斷為陽(yáng)性。用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。2、培養(yǎng)瘢痕成纖維細(xì)