胸腺素β4對人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞膠原合成和CTGF表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　擬通過觀察人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞(hypertrophicscar fibroblasts HSFB)經(jīng)胸腺素β4(thymosin beta4)干預(yù)后，檢測其Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白的生成水平及表達(dá)結(jié)締組織生長因子(connective tissue growth factor CTGF)的變化，以期了解胸腺素β4在病理性瘢痕發(fā)病中的作用機(jī)制。
　　方法:
　　標(biāo)本來自本院整形科的患者（傷后半年內(nèi)），采用組織塊

2、消化法培養(yǎng)細(xì)胞。成纖維細(xì)胞培養(yǎng)至3-6代細(xì)胞后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，共分成5組，其中空白對照組，加入無血清的培養(yǎng)基;實(shí)驗(yàn)組:加入不同濃度的胸腺素β4（0.05、0.1、1、5μg/mL）無血清培養(yǎng)基作用培養(yǎng)6小時(shí)。(1)采用ELISA法檢測細(xì)胞上清液中Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白的含量;(2)通過反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法觀察結(jié)締組織生長因子(CTGF) mRNA的表達(dá);(3)采用蛋白印跡法(Western blot)觀測CTGF蛋白的表達(dá)。

3、r>　　結(jié)果:
　　(1)各實(shí)驗(yàn)濃度的胸腺素β4作用6小時(shí)后Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白分泌的值為:5μg/ml組（0.111±0.004、0.112±0.010），1μg/ml組（0.113±0.005、0.140±0.030），0.1μg/ml組（0.114±0.006、0.178±0.010），0.05μg/ml組（0.117±0.004、0.190±0.016），空白組（0.154±0.105，0.222±0.003），各實(shí)驗(yàn)組與對

4、照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)果顯示，各實(shí)驗(yàn)濃度胸腺素β4作用后增生性瘢痕成纖維細(xì)胞Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白的分泌量減少。
　　(2)各實(shí)驗(yàn)濃度的胸腺素β4作用6小時(shí)后(CTGF) mRNA表達(dá)灰度比值為:5μg/ml組（0.556±0.050），1μg/ml組(0.638±0.038),0.1μg/ml組（0.730±0.026），0.05μg/ml組（0.873±0.035），空白組（1.132±0.074），各實(shí)驗(yàn)組與對

5、照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)果顯示，各實(shí)驗(yàn)濃度（0.05、0.1、1、5μg/mL）胸腺素β4作用后增生性瘢痕成纖維細(xì)胞CTGFmRNA表達(dá)降低。
　　(3)各實(shí)驗(yàn)濃度的胸腺素β4作用6小時(shí)后(CTGF)蛋白表達(dá)灰度比值為:5μg/ml組（0.510±0.044），1μg/ml組(0.532±0.026),0.1μg/ml組（0.658±0.032），0.05μg/ml組（0.743±0.035），空白組（0.953±