IFN~γ對膽管損傷后瘢痕成纖維細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：探討γ干擾素（IFN～γ)對體外培養(yǎng)的膽總管損傷愈合過程中瘢痕來源的成纖維細(xì)胞生物學(xué)作用的影響,為臨床防治膽管狹窄尋求一條新的途徑。方法：制作兔肝外膽管損傷修復(fù)動物模型,將γ干擾素加入瘢痕成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)，采用MTT比色法測定細(xì)胞增殖率，應(yīng)用流式細(xì)胞儀分析IFN～γ對膽管瘢痕成纖維細(xì)胞的細(xì)胞周期生物學(xué)行為的影響結(jié)果.采用SPSS16.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。結(jié)果：1.顯微鏡下觀察,體外培養(yǎng)的肝外膽管瘢痕組織塊在接種后6～8d 可見

2、成纖維細(xì)胞游離生長。對照組胞體較大,呈梭形或多角形,細(xì)胞可見2～4個長短不一的突起,邊界較清;實(shí)驗(yàn)組加入IFN～γ后,細(xì)胞生長密度降低,細(xì)胞間排列較疏松,胞體萎縮變小,有的逐漸呈圓形回縮。2.MTT 比色實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,加入IFN～γ,培養(yǎng)24 h后實(shí)驗(yàn)組與對照組OD值之間的差異無顯著性(P>0．05)，，加入IFN～γ培養(yǎng)48 h后與對照組比較，其中2 000U/ml濃度組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異性（P＞0.05)， 而在4 000、6 000、8

3、 000、10000U/ml濃度組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異性（P＜0.05)，說明實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞數(shù)明顯少于對照組，提示當(dāng)IFN～γ達(dá)到一定濃度時能抑制膽管瘢痕成纖維細(xì)胞的分裂增并且在該濃度范圍內(nèi), IFN～γ對肝外膽管瘢痕成纖維細(xì)胞增殖活性的抑制作用具有濃度依賴性，隨著IFN～γ濃度的增加，細(xì)胞增殖的抑制作用隨之增加。3.流式細(xì)胞術(shù)測定結(jié)果顯示對照組成纖維細(xì)胞培養(yǎng)48 h處于S-G2-M期的百分比為(52.388±2.434)％，加入IFN～γ作用48

4、 h, 2 000U/ml濃度組差異無顯著性意義（P＞0.05) ;而4 000、6 000、8 000、10000U/ml濃度組處于S-G2-M期的百分比均明顯高于對照組（P＜0.01)。隨著藥物濃度加大,DNA合成前期細(xì)胞百分?jǐn)?shù)逐漸增多,而DNA合成期和合成后期細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)逐漸減少。結(jié)論：IFN～γ對膽管瘢痕成纖維細(xì)胞的生長趨勢及增殖活性有明顯抑制作用,并且IFN～γ與細(xì)胞數(shù)量改變之間有一定的劑量--效應(yīng)關(guān)系。提示IFN～γ在抑制膽