肌成纖維細(xì)胞自噬趨勢(shì)對(duì)腎組織損傷的影響.pdf

1、目的：
　　通過(guò)觀察UUO大鼠腎臟肌成纖維細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白α-SMA、LC-3的表達(dá)，探討肌成纖維細(xì)胞自噬趨勢(shì)對(duì)早期腎組織損傷的影響。
　　方法：
　　采用單側(cè)輸尿管結(jié)扎方法建立腎組織損傷模型，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為72只健康雄性SD大鼠,體重110±20g,，隨機(jī)分為三組：假手術(shù)組(手術(shù)分離但不結(jié)扎左側(cè)輸尿管)，模型組(手術(shù)分離并結(jié)扎輸尿管近腎盂段)及治療組(輸尿管結(jié)扎后用雷帕霉素治療)。造模成功后，分別于3，7，10，14天在

2、各組中隨機(jī)處死6只大鼠，行Masson染色動(dòng)態(tài)觀察各組梗阻側(cè)腎組織損傷程度，免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)各組α-SMA、LC-3在腎組織的表達(dá)及分布變化。
　　結(jié)果：
　　（1）Masson染色顯示假手術(shù)組腎組織無(wú)明顯病理變化；模型組可見(jiàn)腎小管上皮腫脹，炎性細(xì)胞增多浸潤(rùn)，腎間質(zhì)中深藍(lán)色陽(yáng)性染色面積明顯可見(jiàn)，梗阻時(shí)間越長(zhǎng)越明顯，各時(shí)間點(diǎn)比較有顯著差異（P＜0.01）。雷帕霉素治療組也可見(jiàn)腎小管上皮腫脹，炎性細(xì)胞增多浸潤(rùn)，但腎間質(zhì)中深

3、藍(lán)色陽(yáng)性染色面積在各時(shí)間點(diǎn)較模型組明顯減少（P＜0.01），但仍多于假手術(shù)組（P＜0.01）。（2）免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)腎臟中α-SMA、LC-3的表達(dá)：假手術(shù)組：腎臟α-SMA蛋白表達(dá)于血管平滑肌細(xì)胞胞漿，余腎臟細(xì)胞無(wú)表達(dá)，各時(shí)間點(diǎn)無(wú)明顯差異（P>0.05）；而腎臟血管平滑肌細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞、足細(xì)胞等處可見(jiàn)LC-3蛋白表達(dá)。模型組：隨著梗阻時(shí)間的延長(zhǎng)，逐漸于腎間質(zhì)、腎小管上皮細(xì)胞、腎小球系膜區(qū)可見(jiàn)α-SMA蛋白表達(dá)且表達(dá)水平逐漸升

4、高；LC-3蛋白在腎臟表達(dá)部位與假手術(shù)組大致相同，但在腎間質(zhì)、腎小管上皮細(xì)胞、腎小球系膜處表達(dá)水平明顯高于假手術(shù)組，各時(shí)間點(diǎn)比較差異顯著（P<0.01）。雷帕霉素治療組：α-SMA，LC-3表達(dá)部位、趨勢(shì)同模型組，α-SMA表達(dá)水平低于模型組， LC-3則高于模型組（P<0.01），但兩者表達(dá)水平均高于同時(shí)間點(diǎn)假手術(shù)組。
　　結(jié)論：
　　腎梗阻早期，肌成纖維細(xì)胞自噬水平顯著增加，提示梗阻早期肌成纖維細(xì)胞自噬水平明顯增高；雷帕