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1、目的:通過(guò)觀察腎衰保腎膠囊對(duì)腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞增殖、膠原蛋白及細(xì)胞因子的影響,闡明腎衰保腎膠囊延緩慢性腎衰竭進(jìn)展及抗腎間質(zhì)纖維化的機(jī)理,為張琪教授復(fù)方多靶點(diǎn)治療復(fù)雜性疾病的學(xué)術(shù)思想提供實(shí)驗(yàn)證據(jù)。方法:體外培養(yǎng)小鼠腎成纖維細(xì)胞,采用藥物刺激后,MTT法觀察細(xì)胞增殖情況;放射免疫法和酶聯(lián)免疫法檢測(cè)細(xì)胞上清液中ColⅣ、LN和TGF-β1的變化;運(yùn)用細(xì)胞免疫學(xué)方法觀察細(xì)胞平滑肌激動(dòng)蛋白α-SMA、波形蛋白和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1的表達(dá)情況;利用半定
2、量RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞ICAM-1及TGF-β1mRNA表達(dá)水平。結(jié)果:腎衰保腎膠囊組細(xì)胞培養(yǎng)液中ColⅣ、LN和TGF-β1的含量下降,與對(duì)照組比有顯著性差異。分別與空白組和尿毒清組比較,腎衰保腎膠囊組減弱腎成纖維細(xì)胞中波形蛋白、平滑肌激動(dòng)蛋白和TGF-β1的表達(dá)。腎衰保腎膠囊降低體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞的增殖速度,并且與藥物濃度和時(shí)間呈現(xiàn)正相關(guān)。抑制ICAM-1和TGF-β1的mRNA表達(dá)水平,并且與藥物劑量呈現(xiàn)正相關(guān)。結(jié)論:腎衰保腎膠
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