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文檔簡介
1、目的:探討溫陽活血方含藥血清對體外培養(yǎng)的大鼠腎成纖維細胞(rats renal fibroblasts,RRF)結(jié)締組織生長因子(connective tissue growth factor,CTGF)表達的影響。 方法:以單側(cè)輸尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)法制備腎間質(zhì)纖維化動物模型,給予藥物干預(yù)后14d獲取含藥血清。采取消化法獲取RRF,并體外培養(yǎng)。所獲細胞分別給予不同
2、濃度的溫陽活血方和西藥福辛普利含藥血清干預(yù)培養(yǎng)72h,用酶聯(lián)免疫吸附檢測法檢測細胞培養(yǎng)上清中纖維粘連蛋白(fibronectin,F(xiàn)N)、層粘蛋白(laminin,LN)濃度,免疫細胞化學(xué)法檢測RRF表達CTGF水平,實時定量PCR(real-time quantitative PCR,RTQ-PCR)檢測細胞轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)mRNA、CTGF mRNA的表達
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