探討MIF在病理性瘢痕及正常皮膚中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的：目前病理性瘢痕的發(fā)病機(jī)制仍未明確，臨床上缺乏有效藥物治療;巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)參與了多種疾病的發(fā)生、發(fā)展過程，它在腫瘤、自身免疫性疾病、炎癥反應(yīng)、血管新生等方面發(fā)揮重要作用，這些生物學(xué)特征與病理性瘢痕尤其瘢痕疙瘩較為相似。本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用免疫組織化學(xué)染色的方法，檢測(cè)巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕、正常皮膚組織中的表達(dá)情況，說明MIF分布位置和數(shù)量的差異，為探索MIF在病理性瘢痕發(fā)病機(jī)制中的作用提供初步依據(jù)

2、。
　　方法：收集臨床病理性瘢痕切除手術(shù)后標(biāo)本共40例，其中瘢痕疙瘩組20例，增生性瘢痕組20例，另取正常皮膚標(biāo)本10例作為對(duì)照。將所取標(biāo)本于10％的中性福爾馬林中固定12h后，常規(guī)梯度酒精脫水，浸蠟包埋切片，分別做蘇木精-伊紅(HE)染色和免疫組織化學(xué)染色（HRP法）。用兔抗人巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子多克隆抗體染色后的MIF陽性信號(hào)為黃色或棕黃色顆粒。將切片在光學(xué)顯微鏡下觀察各組的染色情況并隨機(jī)選擇5個(gè)視野，計(jì)算每個(gè)視野細(xì)胞中的陽性

3、細(xì)胞百分率，取平均值。同一人在同一臺(tái)顯微鏡相同放大倍數(shù)下觀察計(jì)數(shù)。
　　結(jié)果：㈠HE染色光鏡下組織形態(tài)：①正常皮膚組中可以清楚的看到表皮的分層，角質(zhì)層與透明層融合，呈嗜酸性，矮柱狀的基底細(xì)胞弱嗜堿性，真皮乳頭緊靠表皮，不同部位的真表皮分界處形態(tài)差異較大，其中眼瞼部位真表皮分界明顯，真皮乳頭呈水平型排列，低矮，變平，腰腹部真皮乳頭突出明顯，數(shù)目較多，突入表皮層;乳頭層較疏松，著色較淡，網(wǎng)織層較厚、致密，可見較多膠原纖維，成纖維細(xì)胞分

4、布其間，數(shù)目少，核小深染;正常皮膚組織中可見汗腺、皮脂腺、毛囊及導(dǎo)管等皮膚附屬器。②增生性瘢痕組基底細(xì)胞層和棘層細(xì)胞層相對(duì)層數(shù)較多，組織疏松，透明層與角質(zhì)層較薄，真皮乳頭突出度低平，數(shù)目較正常皮膚減少;網(wǎng)織層厚，致密，可見粗大膠原水平型排列，部分不規(guī)則，染色深，并可見血管、淋巴管，毛細(xì)血管擴(kuò)張，可見圍管性炎癥細(xì)胞存在，較少皮膚附屬器分布，成纖維細(xì)胞兩層均見，數(shù)目多。③瘢痕疙瘩組表皮層萎縮，顆粒層、透明層與角質(zhì)層較薄，嗜酸性;基底層、棘層

5、細(xì)胞胞體大，層數(shù)較多;真皮乳頭可見，組織疏松，低平;網(wǎng)織層厚，見粗大的膠原，增生明顯，呈漩渦狀或結(jié)節(jié)狀分布，染色深，排列紊亂、縱橫交錯(cuò)，伴有不同程度的玻璃樣變性，表現(xiàn)為均質(zhì)嗜伊紅染色的片狀結(jié)構(gòu)，各結(jié)節(jié)之間由粗的纖維束將其分隔;可見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，不同時(shí)期的成纖維細(xì)胞兩層均可見，數(shù)目多，體積大，核大，胞漿豐富;微血管管腔閉塞或部分閉塞。㈡巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子免疫組化圖像分析：①正常皮膚組:MIF主要表達(dá)于表皮層，真皮組織中少量表達(dá)，皮膚附屬

6、器著色較深，毛囊、皮脂腺及導(dǎo)管等可見棕黃色顆粒。②增生性瘢痕組:MIF陽性顆粒較正常皮膚組多，著色深，主要分布在表皮細(xì)胞的全層及真皮組織的成纖維細(xì)胞層;③瘢痕疙瘩組:MIF陽性顆粒較正常皮膚組、增生性瘢痕組密度大、分布廣、著色深，其中以成纖維細(xì)胞層、小血管周圍陽性顆粒分布最多。瘢痕疙瘩組和增生性瘢痕組的MIF陽性細(xì)胞百分率均多于正常皮膚組，相比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，瘢痕疙瘩組與增生性瘢痕組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。