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文檔簡介
1、 目的:確定內(nèi)皮素(endothelin,ET)-1能否直接誘導(dǎo)皮層神經(jīng)元釋放一氧化氮(Nitric oxide,NO),以及所經(jīng)過的ET受體亞型。
方法:神經(jīng)元培養(yǎng)取自SD乳鼠(出生24h內(nèi))大腦皮層細(xì)胞,體外原代培養(yǎng)7d用于實驗。首先以不同濃度的ET-1(10 nM,100 nM)刺激神經(jīng)元,在加藥前,加藥后30 min和加藥后6h收集培養(yǎng)基,以硝酸還原酶法檢測培養(yǎng)基中NO的濃度。接著,在10 nM ET-1處理的同時,
2、分別加入BQ123(選擇性ET_A受體拮抗劑)、BQ788(選擇性ET_B受體拮抗劑)、PD145065(非選擇性ET受體拮抗劑),作用6h后檢測培養(yǎng)基中NO濃度。
結(jié)果:10nM及100 nM ET-1作用6 h后,神經(jīng)元培養(yǎng)液中NO的濃度明顯高于對照組(P值分別為0.029,0.015),而二者之間則沒有顯著性差異(P=1.000)。BQ788和PD145065可分別完全阻斷ET-1刺激神經(jīng)元釋放NO的作用,使其培養(yǎng)液中N
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