速效救心丸抗動脈粥樣硬化作用及機制的研究.pdf

1、目的：本實驗通過建立大鼠動脈粥樣硬化(AS)模型，觀察速效救心丸對AS的預防性干預作用，并探討速效救心丸的抗AS的作用及其可能的作用機制。 方法：采用高脂飲食加大劑量鈣負荷(一次性腹腔注射維生素D360萬U/kg)方法建立大鼠AS模型。選用健康雄性成年Sprague-Dawlay(SD)大鼠60只，隨機分為6組：①正常對照組(N)：普通飼料；②模型組(M)：高脂飼料；③速效救心丸低劑量治療組(SXL)：高脂飼料+SX60mg·k

2、g-1·d-1；④速效救心丸中劑量治療組(SXM)：高脂飼料+SX600mg·kg-1·d-1；⑤速效救心丸高劑量治療組(SXH)：高脂飼料+SX1800mg·kg-1·d-1；⑥西藥阿托伐他汀組(Astorvastatin，ATO)：高脂飼料+阿托伐他汀4mg·kg-1·d-1；各治療組藥物自造模第一天開始灌胃給予，正常對照組及模型組給予等量生理鹽水灌胃，共飼養(yǎng)12周。光鏡下行HE、Masson染色觀察主動脈的病理變化，透射電鏡下觀察

3、主動脈超微結(jié)構(gòu)改變；生化方法測定血清中總膽固醇(totalcholesterol，TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性；酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心方法測定血清中氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)；免疫組織化學法檢測三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1(ABCA1)和血紅素氧合酶-1(HO-1)在主動脈的表達情況。 結(jié)果：1.主動脈形態(tài)學改變：(1)光鏡下觀

4、察：HE染色可見正常組大鼠主動脈內(nèi)皮細胞連續(xù)完整，內(nèi)膜光滑；模型組大鼠血管內(nèi)膜明顯增厚，不光滑，內(nèi)皮細胞呈連續(xù)性缺失，內(nèi)皮下間隙增寬，內(nèi)有脂質(zhì)沉積；中膜明顯增厚，平滑肌細胞增殖增生明顯，排列不規(guī)則，向內(nèi)膜遷移，彈力纖維排列紊亂，部分斷裂，局部向管腔突出，細胞間隙可見脂質(zhì)沉積。速效救心丸低劑量組病理改變與橫型組相比，并無明顯改善；但中、高劑量組及西藥組主動脈內(nèi)膜比較光滑，局部輕微增厚，內(nèi)皮細胞部分缺失，彈力纖維排列基本整齊，病理改變較模型

5、組明顯減輕，并且高劑量和西藥組效果更明顯。MASSON染色可見：正常組大鼠主動脈內(nèi)膜膠原含量極少，彈力纖維完整，排列規(guī)則；模型組主動內(nèi)膜明顯增厚，增厚的內(nèi)膜下大量著色較重的藍染膠原纖維，彈力纖維明顯減少，排列極其紊亂，扭曲斷裂；速效救心丸低劑量抑制血管膠原纖維的作用不明顯；中、高劑量組和西藥組主動脈血管內(nèi)膜及中膜藍染的膠原纖維減少，著色輕，彈力纖維排列基本整齊，以高劑量組和西藥組效果最明顯。(2)透射電鏡下觀察：正常組大鼠主動脈內(nèi)膜薄，

6、內(nèi)皮完整，內(nèi)皮細胞呈長梭形，連接緊密，內(nèi)彈力板完整連續(xù)，中膜平滑肌細胞大小均勻，細胞器結(jié)構(gòu)正常；模型組主動脈內(nèi)膜增厚，不光滑，不連續(xù)，內(nèi)皮細胞間連接破壞，微絨毛缺失，胞膜缺失，為裸核，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張呈圓形，有嚴重脫顆?，F(xiàn)象，吞飲小泡明顯減少，內(nèi)皮下間隙寬窄不一。速效救心丸低劑量組血管超微結(jié)構(gòu)改變基本和模型組相同；中、高劑量組和西藥組的超微結(jié)構(gòu)則明顯減輕，內(nèi)皮細胞較完整，細胞之間連接較好，內(nèi)皮下間隙明顯變規(guī)則、清晰，平滑肌細胞遷移明顯減少

7、。2.血清中指標的改變：模型組大鼠血清中TC、TG、LDL和HDL均高于正常對照組，兩者差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，預防性給藥后，速效救心丸低劑量組大鼠血脂各項水平變化不明顯(P>0.05)，而中、高劑量組和西藥組能明顯降低各組大鼠血清中TC、TG和LDL水平，升高HDL水平，尤以高劑量組和西藥組用藥最明顯(P<0.01)。模型組大鼠血清中SOD活性明顯低于正常組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，MDA.及ox-LDL含量顯著高

8、于正常組(P<0.05)。速效救心丸預防組中低劑量組對SOD及ox-LDL影響不明顯，差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)；中、高劑量組和西藥組能升高SOD含量、降低MDA及ox-LDL含量，與模型組相比，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。3.主動脈壁ABCA1表達量的改變：模型組主動脈壁ABCA1表達高于正常組(P<0.05)，速效救心丸低、中劑量對其表達無明顯影響(P>0.05)，高劑量組主動脈壁ABCA1表達高于模型組(P<0.05

9、)，而西藥組則抑制ABCA-1的表達(P<0.05)。4.主動脈管壁HO-1表達量的改變：模型組主動脈壁HO-1表達高于正常組(P<0.05)，速效救心丸低劑量對其表達無明顯影響(P>0.05)，中、高劑量及阿托伐他汀組主動脈壁HO-1表達高于模型組(P<0.05)。 結(jié)論：高脂飲食加一次性大劑量VitD3負荷共同作用可成功建立大鼠早期AS模型。速效救心丸具有降血脂、抗脂質(zhì)過氧化等抑制AS的形成的作用，其可能的機制是：(1)速效