血管內皮生長因子mRNA在原發(fā)性肺癌中的表達和意義.pdf_第1頁
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1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文血管內皮生長因子mRNA在原發(fā)性肺癌中的表達和意義姓名：楊榮利申請學位級別：碩士專業(yè)：胸外科學指導教師：陳東義2000050114例，平均年齡5744111(范圍34～74歲)；鱗癌13例，小細胞肺癌6例，腺癌10例，大細胞肺癌3例，混合癌2例；TNM分期I期13例，II期12例，III期9例。實驗方法1總RNA提?。焊髑腥〖s300毫克肺癌組織及正常肺組織，用TRIzol試劑法提取總RNA，于分光光度計下測定RN

2、A濃度，調整其終濃度為1pg／肛l，然后置于一80℃深低溫冰箱中凍存。2反轉錄及PCR擴增：適量總RNA加入OligodT引物，于70℃孵育lO分鐘，再加入buffer、dNTP、RNA酶抑制劑及AMV，于37℃孵育50分鐘。在此基礎之上進行PCR擴增，PCR反應體系如下：取RT產物5皿，依次加入緩沖液、VEGF上、下游引物、TaqE、ddH20，然后送PCR儀上擴增。PCR反應條件為：95℃變性2分鐘，按94“C1分鐘，55℃1分鐘，

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