三七的18S rRNA， matK基因序列和HPLC化學指紋圖譜檢測與分析研究.pdf

1、目前中藥質(zhì)量標準化多從化學成分及其含量方面進行考察,而作為質(zhì)量標準化的前提和關鍵的品種標準化則已經(jīng)深入到分子水平進行檢測分析,從分子生物學的角度為中藥物種的地理分布和分化變異判定提供了科學依據(jù).該研究的目的是基于基因和化學指紋圖譜檢測兩個方面來分析名貴中藥三七的18S rRNA和matK基因的分子特征和三七的化學指紋特征.方法:①利用分子生物技術平臺,對不同產(chǎn)地的三七以及常見偽品進行基因組DNA的提取、PCR擴增、序列測定,分析三七及其

2、常見偽品的基因序列差異,以及不同產(chǎn)地三七的DNA分子特征.②利用HPLC的化學分析技術,對不同產(chǎn)地三七和三七不同藥用部位進行化學指紋圖譜分析,明確產(chǎn)地對三七化學成分的影響,以及三七不同部位的指紋特征.結論:①不同產(chǎn)地三七的DNA序列沒有出現(xiàn)差異,除其本身的遺傳特征可能具有高度的保守性外,還有可能是長期的栽培過程中,種質(zhì)資源已趨一致所造成的結果.基因序列標記能從分子水平定性分辨三七及其偽品的遺傳背景差異,為中藥品種標準化提供了先進可行、穩(wěn)

3、定可靠的分子標準,為經(jīng)典中藥材品質(zhì)評價進行了有益的方法學探索.②HPLC指紋圖譜分析可以直觀地為三七的化學成分定性并定量,不同產(chǎn)地的三七主要峰相似,但峰的數(shù)量有所差異,至于差異峰是否可以代表產(chǎn)地的特征峰,還需收集更多批次的樣品來驗證.而各峰所代表的化學成分是否具有藥效學價值,也有待做進一步的譜效學探討.三七不同部位的指紋圖譜尤其是花和葉的指紋特征隨著花和葉的應用增多,將有望成為制定三七花、三七葉新藥用資源質(zhì)控標準的依據(jù),而三七不同商品規(guī)