脫脂哈蟆油膠囊HPLC色譜指紋圖譜研究.pdf

1、哈蟆油具有“健脾養(yǎng)胃、滋陰補(bǔ)腎、潤肺生津”之功效，被稱為軟黃金，極具開發(fā)潛力。由于哈蟆油中膽固醇含量較高，達(dá)0.92％，與蛋黃的膽固醇含量相接近，因此不適宜患高血脂癥的中老年人服用。脫脂哈蟆油膠囊通過超臨界萃取制得，經(jīng)含量測定，其膽固醇含量為0.08％，大大降低了其膽固醇含量，從而使其使用人群更加廣泛。本課題為“脫脂哈蟆油膠囊HPLC 色譜指紋圖譜研究”。由于中藥成分復(fù)雜，僅對某個有效成分進(jìn)行定性定量分析并不能有效控制其質(zhì)量，目前指紋圖

2、譜已成為國際公認(rèn)的控制質(zhì)量的有效手段。本實(shí)驗(yàn)旨在通過HPLC法對脫脂哈蟆油膠囊進(jìn)行研究，確立其色譜條件，建立指紋圖譜的共有模式，從而從整體上控制脫脂哈蟆油膠囊的質(zhì)量。本實(shí)驗(yàn)采用系統(tǒng)溶劑提取法對提取溶劑進(jìn)行考察，選擇了甲醇作為提取溶劑；通過正交實(shí)驗(yàn)，確定了最佳提取工藝；根據(jù)指紋圖譜的三維圖，確定檢測波長為215nm；經(jīng)過對多種流動相的考察，確定了乙腈－水為其流動相，采用梯度洗脫。通過對色譜條件的摸索及優(yōu)化，最后確定脫脂哈蟆油膠囊HPLC

3、指紋圖譜的色譜條件為：色譜柱：Kromasil C18(5μm 100àTiANHE? TH 1025 250mm×4.6mm S/N:06L25514)；流動相：乙腈－水梯度洗脫；柱溫：30℃；檢測波長：215nm；進(jìn)樣量：7μl，運(yùn)行25min。經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證，精密度、重復(fù)性和穩(wěn)定性良好，相對保留時間和峰面積大于10％的峰的相對峰高RSD 均小于3％，相似度大于0.95，符合指紋圖譜要求。在該色譜條件下，通過對十批脫脂哈蟆油膠囊指紋圖