產(chǎn)銀杏內(nèi)酯B內(nèi)生真菌的篩選及培養(yǎng)條件優(yōu)化.pdf

1、銀杏葉中的萜內(nèi)酯類化合物具有擴(kuò)張血管、增加血流量、降低腦血管阻力、抑制血栓形成等多種作用，尤其銀杏內(nèi)酯B是目前發(fā)現(xiàn)的最有效的特異的血小板活化因子(PAF)拮抗劑，已成為世界多國醫(yī)藥專家的研究熱點(diǎn)。內(nèi)生真菌長期生活在植物組織內(nèi)部，與宿主協(xié)同進(jìn)化，在演化過程中二者形成了互惠共生的關(guān)系，在宿主的生長發(fā)育和系統(tǒng)演化過程中起重要作用。某些植物內(nèi)生真菌可產(chǎn)生一些重要的治療人類疾病的藥物，因此，通過對內(nèi)生真菌次級代謝產(chǎn)物的研究，可以篩選得到一些結(jié)構(gòu)新

2、穎、活性專一的活性物質(zhì)。 本文以銀杏內(nèi)生真菌為研究對象，通過對內(nèi)生真菌次級代謝產(chǎn)物的研究，定向篩選銀杏內(nèi)酯B產(chǎn)生菌，并對其進(jìn)行液態(tài)培養(yǎng)條件的優(yōu)化。本論文得到如下主要結(jié)果： 1.從銀杏植物不同部位共分離出內(nèi)生真菌109株，其中從樹根中分離到的有33株、樹皮中15株、葉中57株、果實(shí)中4株。 2.TLC分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)有16株菌的培養(yǎng)物與標(biāo)品有相同的遷移位點(diǎn)和相似的斑點(diǎn)顏色，經(jīng)HPLC進(jìn)一步分析觀察到有3株菌的發(fā)酵濃縮液

3、與標(biāo)品有相同的保留時間，綜合在薄層板上的熒光顯色和在液相色譜上的保留行為確定菌株G10為可以產(chǎn)生銀杏內(nèi)酯B的內(nèi)生真菌，因此選擇G10為后續(xù)試驗(yàn)的出發(fā)菌株。 3.對液相色譜分析中有相同保留時間的3株菌G10、Y30和Y40進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，包括菌落形態(tài)、菌絲體生長狀態(tài)和分生孢子的著生情況，初步鑒定分別為卵形孢霉屬、枝鏈孢霉屬和青霉屬。 4.確立了菌株G10的適宜發(fā)酵培養(yǎng)基組分組成為蔗糖40g/L、硝酸鈉1.73g/L、磷酸氫