己酮可可堿聯(lián)合生育酚減少大鼠放射性心臟損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分大鼠心臟照射后TGF-β1 mRNA表達(dá)水平及組織學(xué)改變的實(shí)驗(yàn)研究研究。 目的:探討大鼠受照后心臟轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(transfoming growth factorβ1，TGF-β1)mRNA水平隨時(shí)間的變化，并通過(guò)組織學(xué)檢查了解TGF-β1水平變化與放射性心臟損傷發(fā)生發(fā)展的關(guān)系，為進(jìn)一步抗纖維化藥物治療放射性心臟損傷的實(shí)驗(yàn)研究提供參考。 資料與方法 60只大鼠隨機(jī)分為2組，對(duì)照組不接受照射，受照組

2、大鼠給予心臟照射20Gy，分別在受照后第1天、第2、4、8、12、24周各解剖5只對(duì)照組和5只受照組大鼠，分別檢測(cè)血清肌鈣蛋白和CK-MB水平變化，定量PCR檢測(cè)心臟組織TGF-β1 mRNA表達(dá)。心臟標(biāo)本切片以Masson染色，每個(gè)標(biāo)本隨機(jī)選取3張切片，每張切片隨機(jī)選取7個(gè)視野，置于Leica Q 500MC顯微圖像分析系統(tǒng)下，以40倍放大觀察，計(jì)算各切片中膠原纖維占視野總面積的百分比。 結(jié)果: 1、照射后24小時(shí)實(shí)驗(yàn)

3、組血清肌鈣蛋白即有升高，2周時(shí)達(dá)到高峰(0.73±0.11ng/ml)，與對(duì)照組(0.11±0.04ng/ml)相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，實(shí)驗(yàn)組CK-MB無(wú)明顯變化，兩組相比差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)； 2、心臟TGF-β1 mRNA表達(dá)在照射后第1天即出現(xiàn)升高，并在第2、12周出現(xiàn)高峰(受照組為8.55±1.19以及4.63±0.41×e<'-8>μg/ml，對(duì)照組為1.27±0.11以及1.35±0.15

4、×e<'-8>μg/ml)，兩組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)； 3、心臟受照后自第2周起纖維細(xì)胞比例增加(受照組為2.87±0.37﹪，對(duì)照組為1.14±0.55﹪)，隨時(shí)間延長(zhǎng)放射性損傷逐漸加重，兩組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；心臟組織纖維化程度的變化與TGF-β1 mRNA表達(dá)水平的變化有顯著的正相關(guān)性(P=0.009). 結(jié)論: 1. TGF-β1參與心臟纖維化形成的全過(guò)程。 2

5、.將體視學(xué)定量與光鏡檢查相結(jié)合能更好判斷心臟組織放射性損傷的狀況。 3.在TGF-β1分泌高峰期使用抗纖維化藥物對(duì)其水平進(jìn)行抑制，有可能對(duì)組織纖維化形成產(chǎn)生預(yù)防作用。 第二部分注射己酮可可堿和生育酚后受照大鼠心臟TGF-β1 mRNA表達(dá)水平及組織學(xué)改變的實(shí)驗(yàn)研究。 研究目的: PTX和Vit.E作為抗氧化劑在皮膚放射性損傷的治療中取得理想效果，而目前由于多學(xué)科綜合治療在胸部腫瘤治療中的廣泛的應(yīng)用，毒副

6、反應(yīng)也相應(yīng)增加。放射性心臟損傷在治療后長(zhǎng)期生存的患者中逐漸成為影響生存率的重要因素。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)在接受大劑量心臟照射的大鼠中聯(lián)合使用PTX和Vit.E，觀察這一聯(lián)合方案觀察聯(lián)合采用PTX和Vit.E時(shí)是否可下調(diào)心臟組織TGF-β1mRNA表達(dá)以及逆轉(zhuǎn)纖維化形成；進(jìn)一步探索給藥時(shí)間是否會(huì)影響抗纖維化治療的效果；在照射過(guò)程中給藥是否可以預(yù)防遠(yuǎn)期纖維化的發(fā)生。 資料與方法: 90只大鼠隨機(jī)分為3組，其中l(wèi)組為對(duì)照組，接受心臟照射

7、(20Gy)以及腹腔注射等量生理鹽水：第2組為實(shí)驗(yàn)1組，大鼠接受心臟照射(20Gy)并自受照前3天起給予每天一次PTX 10mg/kg+Vit.E 15mg/Kg腹腔注射，直至受照后12周停止注射；第3組為實(shí)驗(yàn)2組，大鼠自受照前3天起給予每天一次PTX 10mg/kg+Vit.E 15mg/kg腹腔注射直至受照后24周停止注射。分別在受照后第1天、第2、4、8、12、24周每組各解剖5只大鼠，定量PCR檢測(cè)心臟組織TGF-β1 mRNA

8、表達(dá)。每個(gè)心臟隨機(jī)切取3張切片，以Masson染色，切片置于Leica O 500MC顯微圖像分析系統(tǒng)下，以40倍放大觀察，計(jì)算各切片中膠原纖維占視野總面積的百分比。 結(jié)果: 1.對(duì)照組TGF-β1 mRNA在受照后第2、12周可達(dá)到高峰，實(shí)驗(yàn)1組在第12周前TGF--β1 mRNA表達(dá)都處于較低水平，至24周時(shí)則出現(xiàn)升高，但仍略低于對(duì)照組。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析兩組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)有顯著性差異(P<0.05)。 2.對(duì)照組大

9、鼠受照后第4至8周達(dá)到高峰，實(shí)驗(yàn)1組在第12周前都處于較低水平，至24周時(shí)則出現(xiàn)升高。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析兩組實(shí)驗(yàn)數(shù)兩組數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析存在顯著性差異(P<0.05)。 3.在照射后第1天至第12周，兩組大鼠心臟組織TGF-β1 mRNA表達(dá)水平變化及纖維化程度變化無(wú)明顯差別，第24周時(shí)持續(xù)用藥的實(shí)驗(yàn)2組TGF-β1 mRNA表達(dá)水平及纖維化程度仍保持在較低水平，至12周停止用藥的實(shí)驗(yàn)1組mRNA表達(dá)以及纖維化程度均較實(shí)驗(yàn)2組明顯上升。