異孢鐮孢YZ-03的產(chǎn)毒條件與毒素的生物活性測(cè)定.pdf

1、YZ-03菌株是為害空心蓮子草病原菌異孢鐮孢的一個(gè)菌株，本研究采用生物測(cè)定的方法，研究不同培養(yǎng)基質(zhì)、不同的培養(yǎng)時(shí)間和不同的培養(yǎng)基初始pH值等條件對(duì)YZ-03菌株產(chǎn)生毒素的影響。結(jié)果表明，YZ-03液體培養(yǎng)的最佳產(chǎn)毒條件是用初始pH6.0～7.0的PD培養(yǎng)液，在25℃、120rpm的振蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)30d；而適合YZ-03產(chǎn)毒的最佳固體培養(yǎng)基為菜籽餅培養(yǎng)基、麥粒培養(yǎng)基。 用甲醇、石油醚、乙酸乙酯和去離子水提取YZ-03菌株固體培養(yǎng)

2、物中的粗毒素，提取液經(jīng)濃縮后獲得粗毒素，并進(jìn)行生物活性測(cè)定，結(jié)果表明，甲醇提取的粗毒素10mg/ml處理后，空心蓮子草的病情指數(shù)最高，達(dá)91.42％，而石油醚提取物處理的病情指數(shù)最低，只有29.52％。 采用種子萌發(fā)抑制試驗(yàn)法測(cè)定了粗毒素對(duì)小麥、大麥、玉米、水稻、綠豆、蘿卜、稗草和醴腸胚根和胚芽的抑制，結(jié)果表明，10mg/ml粗毒素(甲醇提取)處理，醴腸、稗草、蘿卜、玉米胚根生長(zhǎng)抑制率分別達(dá)85.62％、78.51％、81.40

3、％和82.18％，幼芽生長(zhǎng)抑制率分別達(dá)69.45％、49.52％、30.42％和45.74％。采用葉碟法測(cè)定粗毒素對(duì)32種植物的致病性，結(jié)果表明，粗毒素對(duì)小藜和玉米葉片的致病性最強(qiáng)，5mg/ml粗毒素處理，小藜和玉米敏感性等級(jí)達(dá)到5級(jí)，其次是空心蓮子草、澤漆和大麥，10mg/ml粗毒素處理，敏感性等級(jí)達(dá)到5級(jí)。 用不同濃度的異孢鐮孢YZ-03菌株粗毒素處理3~4葉期空心蓮子草幼苗，分別測(cè)定了葉片組織細(xì)胞膜透性、葉綠素含量、丙二醛

4、(MDA)含量、活性氧(ROS)產(chǎn)生速率，以及過氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化氫酶(CAT)活性。結(jié)果表明，粗毒素處理后，細(xì)胞膜透性和MDA含量隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞膜透性增加，MDA含量在空心蓮子草體內(nèi)累積，葉綠素含量急劇下降。過氧化物酶(POD)活性隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)而上升，經(jīng)2mg/ml粗毒素處理后48hPOD就達(dá)到最大，比對(duì)照提高了6.19倍，1mg/ml粗