基質(zhì)金屬蛋白酶-2及其組織抑制劑-1在環(huán)孢素A慢性腎毒性中的作用.pdf

1、[目的]探討基質(zhì)金屬蛋白酶-2和基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑-1在環(huán)孢素A慢性腎毒性中的作用。 [方法]以wister大鼠為研究對(duì)象，將24只大鼠隨機(jī)分為四組，每組6只。A組，正常對(duì)照組，每日每只大鼠皮下注射橄欖油1ml/kg；B組，每日每只大鼠皮下注射CsA10mg/kg；C組，每日每只大鼠皮下注射CsA15mg/kg；D組，每日每只大鼠皮下注射CsA20mg/kg。無(wú)鹽鼠飼料喂養(yǎng)，共四周，以建立環(huán)孢素A慢性腎毒性的大鼠模型。實(shí)驗(yàn)

2、期間，大鼠自由攝食、飲水，自然晝夜采光，室溫18～28℃，相對(duì)濕度60％～80％。于最后一次注射后24小時(shí)以1％戊巴比妥鈉5ml/kg腹腔注射，麻醉大鼠后開(kāi)腹，自下腔靜脈取血測(cè)血肌酐以及血環(huán)孢素濃度，迅速取左腎置于液氮中保存，以異硫氰酸胍法提取組織總mRNA，通過(guò)熒光定量RT-PCR的方法，檢測(cè)腎組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑-1(TIMP-1)的mRNA表達(dá)情況研究，不同劑量環(huán)孢素A(10mg/kg、

3、15mg/kg、20mg/kg皮下注射)對(duì)大鼠腎組織中MMP-2、TIMP-1基因表達(dá)的影響情況。取右腎沿腎長(zhǎng)軸剖開(kāi)，置于中性福爾馬林溶液中固定，經(jīng)洗滌、脫水、透明等操作后進(jìn)行蠟塊包埋，切片然后制片，以HE染色在光鏡下觀察腎組織的病理改變。 [結(jié)果](1)各處理組較對(duì)照組的TIMP-1mRNA的表達(dá)均增加，差異有顯著性(P＜0.05)。且各處理組TIMP-1mRNA的表達(dá)量均隨環(huán)孢素A劑量的增加而呈遞增趨勢(shì)(r=0.85)。(2

4、)各處理組較對(duì)照組的MMP-2mRNA的表達(dá)均增加，差異有顯著性(P＜0.05)。(3)經(jīng)過(guò)注射CsA4周，各處理組大鼠平均體重較對(duì)照組明顯降低(P＜0.05)，最高注射劑量組大鼠平均體重最低。(4)各處理組血肌酐較對(duì)照組明顯升高，但各處理組之間差異無(wú)顯著性。(5)血CsA濃度隨注射劑量的增加而增加(P＜0.05)。 [結(jié)論]CsA慢性腎毒性大鼠模型中出現(xiàn)了典型CsA腎毒性的形態(tài)學(xué)改變?nèi)缒I小球入球小動(dòng)脈擴(kuò)張、玻璃樣變，腎間質(zhì)條狀