褪黑素對關節(jié)軟骨細胞的保護作用及微創(chuàng)入路治療髖骨性關節(jié)炎研究.pdf

1、第一部分:基礎實驗
　　1實驗研究一:豬正常軟骨細胞系建立與鑒定
　　目的:建立豬的正常軟骨細胞系，研究其細胞形態(tài)和增殖特點。為后續(xù)研究藥物對軟骨細胞增殖、凋亡特點以及藥物如何發(fā)揮保護軟骨作用的具體機制提供技術基礎和支撐。
　　方法:通過鼓樓醫(yī)院實驗中心協(xié)助，選購江蘇省農(nóng)科院約克夏豬3頭，(雌性，3月大，10kg)，采用胰酶、Ⅱ型膠原酶序貫消化法收集原代細胞，倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞生長變化。采用MTT法繪制細胞增值

2、曲線;通過甲苯胺藍染色和Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光染色來鑒定細胞種類。
　　結果:原代細胞經(jīng)鑒定為豬正常軟骨細胞有限細胞系。細胞生長正常，鏡下觀察生物學性狀穩(wěn)定。
　　結論:經(jīng)本次實驗驗證，采用胰酶、Ⅱ型膠原酶序貫消化法，可成功培養(yǎng)出生物學特征明顯的正常軟骨細胞有限系。為研究后續(xù)研究(O)A細胞的生物學性狀及基質(zhì)代謝積累了實驗技術基礎。
　　2實驗研究二:褪黑素藥液對正常軟骨細胞代謝的研究
　　目的:探討褪黑素對正常關

3、節(jié)軟骨細胞代謝作用的研究，討論褪黑素應用的可靠性和安全性。
　　方法:取第三代生長期的軟骨細胞，將細胞按給藥濃度分為:空白組、極小劑量組、小劑量組、中劑量組、大劑量組和極大劑量組。各組細胞培育24h及48h后，通過CCK-8試劑檢測細胞增殖大小;各組細胞培育72h、120h后，通過流式細胞儀檢測細胞凋亡比例。
　　結果:褪黑素可明顯促進正常軟骨細胞增殖，而對細胞凋亡，無明顯作用。
　　結論:褪黑素對正常軟骨細胞無不良副

4、作用:可明顯促進正常軟骨細胞增殖，對其凋亡則作用甚微。
　　第二部分:臨床研究-小切口在全髖置換術中的meta分析
　　目的:采用Meta分析法對現(xiàn)已發(fā)表的關于微創(chuàng)入路和傳統(tǒng)入路行全髖置換術治療骨性關節(jié)炎的文獻進行綜合分析，系統(tǒng)評價微創(chuàng)人工全髖關節(jié)置換術(Minimum invasive Totalhip arthroplasty，mini-THA)的安全性及療效。
　　方法:計算機檢索PubMed、OVID數(shù)據(jù)庫、C

5、ochrane圖書館、Elsevier、Springer、維普數(shù)據(jù)庫、中國期刊全文數(shù)據(jù)庫和萬方數(shù)據(jù)庫。檢索時間跨度從2010年至2014年;補充手工檢索《中華外科雜志》等6種中文主要外科雜志及相關參考文獻。收集比較微創(chuàng)人工全髖關節(jié)置換術與傳統(tǒng)置換術的隨機對照試驗(RCT)，根據(jù)改良Jadad評分評價納入研究的方法學質(zhì)量，采用RevMan5.0軟件進行Meta分析，以比較微創(chuàng)髖關節(jié)置換組和常規(guī)髖關節(jié)置換組在手術切口、手術時間、術中失血量、

6、住院時間、術后Harris、假體位置準確度（包括臼杯前傾角、外展角和假體中立位比率）以及術后并發(fā)癥的總發(fā)生率的差異。
　　結果:共納入19篇RCT，包括1708例患者。Meta分析結果顯示:微創(chuàng)入路可顯著降低術中平均出血量且微創(chuàng)入路切口長度明顯短于常規(guī)切口。在術后HHS評分方面，微創(chuàng)入路好于常規(guī)入路，數(shù)值有統(tǒng)計學意義但無臨床意義。術后臼杯前傾角方面，常規(guī)入路好于微創(chuàng)入路，數(shù)值有統(tǒng)計學意義但無臨床意義。在手術時間、術后臼杯位置、假體