阿侖膦酸鈉對(duì)豚鼠自發(fā)性骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨及軟骨下骨的保護(hù)作用.pdf

1、目的:
　　本次實(shí)驗(yàn)的目的旨在于探討在自發(fā)性骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）動(dòng)物模型中，阿侖膦酸鈉（alendronate，ALN）是否可以改善軟骨下骨的微觀結(jié)構(gòu)，減緩軟骨的退變。
　　方法:
　　32只3W齡Dunkin-Hartley（DH）豚鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1w后，隨機(jī)分為4組。16只動(dòng)物分別在1月和3月齡時(shí)處死，即：基線組（base line，BL）和對(duì)照組（Control）；另外16只動(dòng)物從3月齡時(shí)

2、接受 ALN（20μg/kg/2d）或同等劑量生理鹽水治療，在6月齡時(shí)處死，為 ALN組和生理鹽水組（normal saline，NS）。每組動(dòng)物均肉眼大體觀察膝關(guān)節(jié)外觀及滑膜，滑液性狀。蘇木素/伊紅（hematoxylin-eosin，HE）、Masson三色染色法進(jìn)行組織學(xué)檢測(cè)與觀察，并用 Mankin評(píng)分系統(tǒng)評(píng)估軟骨退變程度；免疫組織化學(xué)法用于分析金屬基質(zhì)蛋白酶-3（matrix metalloproteinases-3，MMP-

3、3）和糖胺聚糖（glycosaminoglycans，GAG）在軟骨中的表達(dá)情況。雙能骨密度儀測(cè)量脛骨近段1/4和脛骨平臺(tái)內(nèi)外側(cè)髁軟骨下骨的骨密度（bone mineral density，BMD）；Micro-CT檢測(cè)脛骨平臺(tái)軟骨下骨微觀結(jié)構(gòu)的改變。
　　結(jié)果:
　　組織學(xué)和Mankin評(píng)分結(jié)果顯示，在3月齡（Control組）時(shí)即發(fā)生了骨性關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）樣改變，并且隨著年齡的增長(zhǎng)退變逐漸加重

4、，通過(guò)ALN治療，6月齡（ALN組）時(shí)Mankin評(píng)分分值明顯減少。免疫組化結(jié)果證實(shí)，隨著豚鼠年齡的增加，MMP-3在軟骨中的表達(dá)增多，Control組明顯高于BL組，NS組又顯著高于Control組；但是，GAG的表達(dá)在BL組與Control組之間卻沒(méi)有顯著差異，之后隨著月齡的增加，NS組中GAG的表達(dá)明顯低于Control組；與NS組比較，ALN治療能明顯增加 GAG的表達(dá)同時(shí)顯著降低MMP-3的表達(dá)。隨著OA的發(fā)展，脛骨平臺(tái)內(nèi)外側(cè)

5、髁軟骨下骨密度逐漸升高；Micro-CT結(jié)果表明，通過(guò)ALN治療不僅可以增加軟骨下骨體積分?jǐn)?shù)，同時(shí)可以延緩軟骨下松質(zhì)骨微觀結(jié)構(gòu)從桿狀化至板狀化的改變。
　　結(jié)論:
　　1.3月齡DH豚鼠即具有骨性關(guān)節(jié)炎表現(xiàn)且病變隨著年齡的增長(zhǎng)進(jìn)行性加重。
　　2.ALN20μg/kg/2d皮下注射12w可通過(guò)抑制軟骨內(nèi)MMP-3的表達(dá)，同時(shí)減少GAG的降解來(lái)防止軟骨的退變；也可以通過(guò)改善軟骨下松質(zhì)骨微觀結(jié)構(gòu)，減輕DH豚鼠自發(fā)性骨性關(guān)節(jié)