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文檔簡介
1、第一部分:骨質(zhì)疏松模型和骨關(guān)節(jié)炎模型的制備
目的:
分別制備大鼠骨質(zhì)疏松和骨關(guān)節(jié)炎模型。方法:
8周齡雌性SD大鼠32只,分為4組:A組(假去勢組),B組(OP組);C組(假關(guān)節(jié)炎組),D組(OA組)。B組大鼠去勢,術(shù)后12周時通過雙能X線骨密度儀測定腰椎和股骨的BMD以及通過三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)觀察股骨力學(xué)特性。 D組行改良Hulth法,4周時通過關(guān)節(jié)大體變化和組織切片來驗(yàn)證骨關(guān)節(jié)炎模型。
結(jié)果:
2、> 對于A組和B組:去勢12周后,B組大鼠腰椎和股骨的BMD都低于A組且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(P<0.05);B組大鼠股骨承受的最大應(yīng)力明顯下降(P<0.05)。對于C組和D組:術(shù)后4周,相比C組,D組關(guān)節(jié)周圍滑膜腫脹以及軟骨表面明顯退變;HE染色切片也顯示:D組軟骨結(jié)構(gòu)和細(xì)胞損傷嚴(yán)重,Mankin評分明顯高于C組(P<0.05)。
結(jié)論:
通過去勢法12周是成功制備大鼠OP模型的有效方法,通過改良Hulth法(ACL+M
3、M)4周可以成功制備骨關(guān)節(jié)炎模型。
第二部分 ESWT對伴骨質(zhì)疏松的骨關(guān)節(jié)炎模型軟骨及軟骨下骨結(jié)構(gòu)、代謝及功能的影響
目的:
ESWT對伴骨質(zhì)疏松的骨關(guān)節(jié)炎模型軟骨及軟骨下骨結(jié)構(gòu)、代謝及功能的影響。方法:
8周齡雌性SD大鼠36只,分為3組:Sham組,OPOA組,ESWT組。OPOA組和ESWT組均去勢,在12周驗(yàn)證骨質(zhì)疏松模型后,通過改良Hulth法制備骨關(guān)節(jié)炎模型。改良Hulth法術(shù)后1周,
4、ESWT組開始在軟骨下骨部位給予ESW干預(yù),1周1次,共4次(能量1.6bar,脈沖1000次,頻率為5Hz)。干預(yù)4周后通過組織形態(tài)學(xué)和生物力學(xué)來觀察關(guān)節(jié)軟骨的變化;通過Micro-CT和免疫組化來觀察軟骨下骨的微結(jié)構(gòu)變化;通過步態(tài)分析來觀察大鼠的功能變化。
結(jié)果:
相比Sham組,OPOA組的關(guān)節(jié)周圍滑膜增生,軟骨表面可見裂紋,且Mankin和toluidine blue評分顯著提高。而ESWT組較OPOA組軟骨
5、退變有所改善,Mankin也明顯降低。生物力學(xué)顯示:OPOA組的應(yīng)力應(yīng)變曲線位移和蠕變顯著性增加相對于sham組,經(jīng)ESW干預(yù)4周后,可見關(guān)節(jié)軟骨的力學(xué)特性有所恢復(fù),應(yīng)力應(yīng)變曲線位移(除了0.02N)和蠕變顯著性下降。Micro-CT結(jié)果顯示:OPOA組軟骨下骨微結(jié)構(gòu)明顯破壞, BV/TV、Tb.N和Tb.Th都明顯減少而Tb.Sp明顯增加,ESW干預(yù)4周后,BV/TV、Tb.N和Tb.Th都明顯增加而Tb.Sp顯著性下降。免疫組化顯示
6、:OPOA組BMP-2和Osterix蛋白表達(dá)明顯減少相對于Sham組。經(jīng)ESW治療后,BMP-2和Osterix表達(dá)都顯著性增加。步態(tài)分析結(jié)果顯示:相對于Sham組,OPOA組支撐時相(stance phase),擺動速度(swing speed),和單足支撐時相(single stance phase)顯著性縮短。在ESW干預(yù)4周后,大鼠步態(tài)狀態(tài)有一定的改善,ESWT組支撐時相(stance phase),擺動速度(swing sp
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