菲降解細(xì)菌的分離鑒定及其降解效果研究.pdf

1、多環(huán)芳烴(PAHs)在環(huán)境中分布廣泛，且存在時間長，遺傳毒性高，對人類健康和生態(tài)環(huán)境具有很大危害，由于其具有“三致”作用而備受人們關(guān)注。本研究利用選擇性富集培養(yǎng)及平板升華法，從受石油多年浸泡污染的土壤中分離到2株菲降解細(xì)菌，命名為FC31、FC32；應(yīng)用形態(tài)觀察、BIOLOG系統(tǒng)細(xì)菌鑒定和分子生物學(xué)手段相結(jié)合的方法對兩株細(xì)菌進(jìn)行鑒定，鑒定結(jié)果分別為堅強芽孢桿菌(Bacillusfirmus)和木糖氧化無色桿菌反硝化亞種(Achromob

2、acterxylosoxidanssubsp.denitrificans)；酶活測定實驗顯示兩株菌均具有鄰苯二酚氧化酶活性；分離菌株降解底物廣譜性研究的結(jié)果表明，菌株FC31可以利用兩條降解途徑中的中間代謝產(chǎn)物，菌株FC32不能利用鄰苯二甲酸；高效液相色譜法(HPLC)測定顯示兩株細(xì)菌在液體培養(yǎng)條件下都表現(xiàn)較強降解菲的能力，通過測定液體培養(yǎng)基中菲濃度和菌體密度變化，發(fā)現(xiàn)菌株降解菲的量與其生長密度相關(guān)，隨著菌體濃度(吸光度)的增加，代謝底

3、物菲的濃度明顯降低，兩株菌混合使用能夠大幅度提高菲的降解能力；通過膠內(nèi)裂解法初步確定FC32的菲降解基因位于質(zhì)粒上，PCR擴增提取質(zhì)粒得到約600pb的一條帶，測序后分析與一株木糖氧化無色桿菌的質(zhì)粒相似性很高；在溫室條件下研究不同營養(yǎng)元素對FC31、FC32降解菲的影響，發(fā)現(xiàn)N、P、S、Fe及其組合對土壤中菲的降解率及油菜吸收菲影響顯著；不同的菌劑種類對水稻生物量、菲降解菌存活能力、土壤中菲降解率和水稻吸收菲的量影響顯著；不同有機碳對水