天津海域石油降解細(xì)菌的分離鑒定及其主要降解途徑的研究.pdf

1、近年來(lái)，海洋石油污染不斷加劇，海洋環(huán)境的治理已是迫在眉睫。在現(xiàn)有的治理海洋石油污染的措施中，生物修復(fù)法由于其安全、無(wú)二次污染等優(yōu)點(diǎn)脫穎而出，而石油降解菌就是一類在生物修復(fù)法中扮演著重要角色的微生物。
　　本論文在天津海域表層水樣中分離出了六株烷烴降解細(xì)菌，生理生化分析及分子生物學(xué)鑒定結(jié)果顯示該六株細(xì)菌均屬于檸檬酸桿菌屬（Citrobacter sp.）。分別命名為:Citrobacter sp.TUST-S1～Citrobacte

2、r sp.TUST-S6(GeneBank登錄號(hào)為KM186143～KM186148)。
　　為進(jìn)一步了解所分離的六株菌株降解石油烴的能力，探究了各菌株的降解特性、乳化活性及疏水性。采用萃取技術(shù)結(jié)合GC-MS技術(shù)測(cè)定菌株的降解特性:用正己烷萃取各菌株降解前后培養(yǎng)基中的殘油組分，除水過(guò)濾，于4℃保存。將C7～C30正構(gòu)烷烴及異三十烷的標(biāo)準(zhǔn)品，配制成終濃度100mg/L后，等體積混合，并將異三十烷作為內(nèi)標(biāo)，取相同體積加入到個(gè)樣品中，進(jìn)

3、行GC-MS分析。結(jié)果顯示菌株的降解率相差很大，降解率最小的菌株為Citrobacter sp.TUST-S6，降解率只有39％;降解率最高的菌株為Citrobacter sp.TUST-S5，降解率高達(dá)87％。在對(duì)菌株Citrobacter sp.TUS-T-S5的降解率具體分析時(shí)發(fā)現(xiàn)，該菌株能降解C11～C28的烷烴，對(duì)碳鏈長(zhǎng)度大于C20的烷烴，降解率達(dá)到了80％以上。
　　將等體積的菌懸液與正十六烷渦旋混合后，靜置分層，利用

4、乳化活性及疏水性公式計(jì)算菌株的乳化活性及疏水性，結(jié)果顯示降解率較大的菌株Citrobacter sp.TUST-S5的乳化活性及疏水性也相對(duì)較大，分別為47.86％和38.30％，推測(cè)降解過(guò)程中，菌株產(chǎn)生的乳化作用及疏水作用可能會(huì)促進(jìn)降解作用。
　　鑒于Citrobacter sp.TUST-S5具有較高的降解率，以Citrobacter sp.TUST-S5為實(shí)驗(yàn)材料，測(cè)定了菌株的生長(zhǎng)與降解之間的關(guān)系、降解關(guān)鍵酶基因(alkB)