天津海域石油降解細菌的分離鑒定及其主要降解途徑的研究.pdf

1、近年來，海洋石油污染不斷加劇，海洋環(huán)境的治理已是迫在眉睫。在現(xiàn)有的治理海洋石油污染的措施中，生物修復法由于其安全、無二次污染等優(yōu)點脫穎而出，而石油降解菌就是一類在生物修復法中扮演著重要角色的微生物。
　　本論文在天津海域表層水樣中分離出了六株烷烴降解細菌，生理生化分析及分子生物學鑒定結果顯示該六株細菌均屬于檸檬酸桿菌屬（Citrobacter sp.）。分別命名為:Citrobacter sp.TUST-S1～Citrobacte

2、r sp.TUST-S6(GeneBank登錄號為KM186143～KM186148)。
　　為進一步了解所分離的六株菌株降解石油烴的能力，探究了各菌株的降解特性、乳化活性及疏水性。采用萃取技術結合GC-MS技術測定菌株的降解特性:用正己烷萃取各菌株降解前后培養(yǎng)基中的殘油組分，除水過濾，于4℃保存。將C7～C30正構烷烴及異三十烷的標準品，配制成終濃度100mg/L后，等體積混合，并將異三十烷作為內(nèi)標，取相同體積加入到個樣品中，進

3、行GC-MS分析。結果顯示菌株的降解率相差很大，降解率最小的菌株為Citrobacter sp.TUST-S6，降解率只有39％;降解率最高的菌株為Citrobacter sp.TUST-S5，降解率高達87％。在對菌株Citrobacter sp.TUS-T-S5的降解率具體分析時發(fā)現(xiàn)，該菌株能降解C11～C28的烷烴，對碳鏈長度大于C20的烷烴，降解率達到了80％以上。
　　將等體積的菌懸液與正十六烷渦旋混合后，靜置分層，利用

4、乳化活性及疏水性公式計算菌株的乳化活性及疏水性，結果顯示降解率較大的菌株Citrobacter sp.TUST-S5的乳化活性及疏水性也相對較大，分別為47.86％和38.30％，推測降解過程中，菌株產(chǎn)生的乳化作用及疏水作用可能會促進降解作用。
　　鑒于Citrobacter sp.TUST-S5具有較高的降解率，以Citrobacter sp.TUST-S5為實驗材料，測定了菌株的生長與降解之間的關系、降解關鍵酶基因(alkB)