枇杷果實(shí)發(fā)育過(guò)程中果肉酸含量及相關(guān)酶基因的表達(dá).pdf

1、本文以福建枇杷主栽品種高酸的‘解放鐘’和低酸的‘長(zhǎng)紅3號(hào)’為試驗(yàn)材料，研究果實(shí)發(fā)育過(guò)程中果肉有機(jī)酸含量和相關(guān)酶基因表達(dá)的變化，旨在從分子水平上研究枇杷果實(shí)有機(jī)酸代謝酶和液泡膜酶基因的表達(dá)與有機(jī)酸含量的關(guān)系，探討了不同品種果實(shí)間有機(jī)酸含量差異的原因，主要試驗(yàn)結(jié)果如下： 1.枇杷果肉蘋果酸從少量開(kāi)始緩慢積累，而后迅速增加，在發(fā)育后期又降低。后期低酸品種蘋果酸降解的速度和幅度均比高酸品種大，這是低酸品種成熟期果實(shí)酸度低的主要原因。果肉

2、檸檬酸含量變化與蘋果酸的變化基本相似，但含量低，變幅小，前期積累的時(shí)間較短，低酸品種尤為明顯。果肉異檸檬酸含量變化與蘋果酸含量的變化基本相似。 2.采用同源序列克隆法，率先對(duì)細(xì)胞質(zhì)型cyNAD-MDH、細(xì)胞質(zhì)型cyNADP-IDH、線粒體型mNAD-MDH、液泡膜V-ATPase A亞基基因和V-PPase基因的保守區(qū)片段進(jìn)行了克隆，對(duì)所得到的核苷酸序列及相應(yīng)的氨基酸序列在GENBANK上通過(guò)BLAST工具比對(duì)，發(fā)現(xiàn)所得到的核苷

3、酸序列和氨基酸序列與已報(bào)道的其他物種上的其對(duì)應(yīng)基因具有很高的同源性(>80％)，初步證明所得到的片段核苷酸序列為枇杷果實(shí)有機(jī)酸代謝相關(guān)基因中的目的序列。 3.Northern雜交表明，枇杷果實(shí)發(fā)育過(guò)程中果肉cyNAD-MDH基因表達(dá)水平的變化與蘋果酸含量的變化無(wú)明顯的相關(guān)性，其表達(dá)在高酸和低酸品種間無(wú)明顯差別。果肉cyNADP-IDH基因的表達(dá)隨果實(shí)的發(fā)育始終呈上升趨勢(shì)，該基因的表達(dá)可能與檸檬酸的分解有關(guān)。枇杷果肉V-ATPas