?；^程中琯溪蜜柚果實(shí)有機(jī)酸代謝及基因表達(dá)的研究.pdf

1、本研究以琯溪蜜柚(Citrus grandis)成熟果實(shí)汁胞為試材，研究了琯溪蜜柚果實(shí)成熟過程中汁胞?；瘜?duì)有機(jī)酸代謝以及各種礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)元素含量的影響，還采用cDNA-AFLP技術(shù)對(duì)果實(shí)正常汁胞和粒化汁胞進(jìn)行了差異基因篩選。此研究在于明確琯溪蜜柚果實(shí)汁胞?；瘜?duì)有機(jī)酸等品質(zhì)的影響，同時(shí)為從生理和分子水平上闡述果實(shí)汁胞的機(jī)制奠定基礎(chǔ)。主要獲得的結(jié)果如下：
　　1.有機(jī)酸代謝中，發(fā)生粒化的汁胞檸檬酸和異檸檬酸含量降低，這導(dǎo)致可滴定酸含量也下

2、降，而蘋果酸含量升高。檸檬酸含量的降低可能會(huì)加劇粒化的發(fā)生。
　　2.測(cè)定的11個(gè)酸代謝相關(guān)酶活性中，NADP-ME，NAD-ME，CS，ACO和PEPC顯著升高，NADP-MDH和NAD-MDH稍微升高，PK稍微降低，NADP-IDH和NAD-IDH顯著降低，PEPP無明顯變化。PEPC活性的增強(qiáng)會(huì)促進(jìn)蘋果酸的生物合成，從而導(dǎo)致蘋果酸含量的升高。
　　3.克隆出10個(gè)酸代謝相關(guān)酶基因片段，酸代謝酶基因熒光定量PCR分析顯示

3、，除了PEPC基因可能受到翻譯后修飾的影響，其他酸代謝的酶活性都受到轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控。
　　4.測(cè)定了13種礦質(zhì)元素含量，?；陌l(fā)生可能會(huì)導(dǎo)致果實(shí)汁胞內(nèi)礦質(zhì)元素的積累，尤其是P，Mg，S，Zn和Cu五種，這五種礦質(zhì)元素可能直接參與果實(shí)汁胞?；?br>　　5.采用cDNA-AFLP技術(shù)篩選出123條差異基因，其中包括上調(diào)表達(dá)基因70個(gè)，下調(diào)表達(dá)基因53個(gè)。這些差異基因涉及核酸代謝，碳水化合物及能量代謝，蛋白代謝，脂類代謝，應(yīng)激反應(yīng)和