雌孕激素受體亞型、瘦素及其受體與子宮內(nèi)膜異位癥關(guān)系的研究.pdf

1、目的： 檢測卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫(ovarian endometriosis cyst，OEM)組織中雌激素受體α亞型(estrogen receptor alpha，ER-α)、β亞型(estrogen receptor beta，ER-β)、總孕激素受體(progesterone receptor A and B，PR-A+B)、孕激素受體B亞型(progesterone receptor B，PR-B)、總瘦素受體(all of

2、 the splice variants of leptin receptor，OB-R<,T>)和長型瘦素受體(long form splice variant of leptin receptor，OB-R<,L>)基因的表達(dá)，探討各受體亞型在子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis，EM)發(fā)生發(fā)展過程中的意義，為臨床治療的藥物選擇提供理論依據(jù)。 比較OEM患者和非EM患者血清中的瘦素(leptin)水平，探討瘦素與EM的

3、關(guān)系，并評價(jià)瘦素作為酬新的血清學(xué)標(biāo)志物(marker)的價(jià)值。方法 1．組織中ER-α、ER-β、PR-A+B、PR-B、OB-R<,T>和OB-R<,L>的檢測 采用逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chainreaction assay，RT-PCR)技術(shù)檢測30例OEM患者切除的巧克力囊腫組織、6例OEM合并子宮腺肌病(adenomyosis，AM)同時(shí)行子宮切

4、除術(shù)患者的在位內(nèi)膜組織和13例非EM患者的正常子宮內(nèi)膜組織中的ER-α、ER—β、PR-A+B、PR-B、OB-R<,T>和OB-R<,L>信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid，mRNA)的表達(dá)，進(jìn)行半定量研究。 2．血清瘦素含量的檢測采用酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)檢測20例OEM患者和16例非E^I患者血清標(biāo)本中的瘦素水平，

5、進(jìn)行對比分析，并分析瘦素與體重指數(shù)(body mass index，BMI)的相關(guān)性。 結(jié)果 1．ER-α mRNA和ER-β mRNA在正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜組織的表達(dá) 1．1 ER-α和ER-β mRNA在正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜組織的表達(dá)率 30例異位內(nèi)膜組織、6例在位內(nèi)膜組織和13例正常內(nèi)膜組織中均有ER-α mRNA表達(dá)，三組的表達(dá)率均為100％(30/30、6/6、13/1

6、3)。30例異位內(nèi)膜組織有19例表達(dá)ER-β mRNA，表達(dá)率為63.33％(19/30)，13例正常內(nèi)膜組織有9例表達(dá)ER-βmRNA，表達(dá)率為69.23％(9/13)，6例在位內(nèi)膜組織有4例表達(dá)ER-β mRNA，表達(dá)率為66.67％(4/6)。與ER-α相比較，ER-β在三種組織中的表達(dá)率均比較低，但三組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 1．2 ER-α和ER-βmRNA在正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜組織的表達(dá)量

7、(ER-α/β-actin、ER-β/β-actin) 30例異位內(nèi)膜組織中ER-αmRNA的表達(dá)量為0.296±0.012，13例正常內(nèi)膜組織中ER-α mRNA的表達(dá)量為0.407±0.024，6例在位內(nèi)膜組織中ER-α mRNA的表達(dá)量為0.397±0.017。異位內(nèi)膜組ER-αmRNA的表達(dá)量與后兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，在位內(nèi)膜組職-αmRNA的表達(dá)量與正常內(nèi)膜組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)

8、。 ER-β mRNA在正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜組織中的表達(dá)量都明顯低于職-α mRNA的表達(dá)量，并且表達(dá)不穩(wěn)定，個(gè)體差異較大。30例異位內(nèi)膜組織中ER-β mRNA的表達(dá)量為0.007±0.009，13例正常內(nèi)膜組織中ER-βmRNA的表達(dá)量為0.022±0.048，6例在位內(nèi)膜組織中ER-βmRNA的表達(dá)量為0.020±0.039。異位內(nèi)膜組ER-β mRNA的表達(dá)量與后兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，在

9、位內(nèi)膜組ER-β mRNA的表達(dá)量與正常內(nèi)膜組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2．PR-A+B mRNA和PR-B mRNA在正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜組織的表達(dá) 2．1 PR-A+B和PR-B mRNA在正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜組織的表達(dá)率 30例異位內(nèi)膜組織、6例在位內(nèi)膜組織和13例正常內(nèi)膜組織中均有PR-A+BmRNA表達(dá)，三組的表達(dá)率均為100％(30/30、6/6、13/13)；1

10、3例正常內(nèi)膜組織和6例在位內(nèi)膜組織均有PR-B mRNA表達(dá)，表達(dá)率為100％(13/13、6/6)，30例異位內(nèi)膜組織中有28例表達(dá)PR—B mRNA，2例未見表達(dá)，表達(dá)率為93.3％(28/30)，與前兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2．2 PR-A+B和PR-B mRNA在正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜的表達(dá)量(PR-A+B/β-actin、PR-B/β-actin) 30例異位內(nèi)膜組織中PR-A+B m

11、RNA的表達(dá)量為0.090±0.017，13例正常內(nèi)膜組織中PR-A+B mRNA的表達(dá)量為0.834±0.109，6例在位內(nèi)膜組織中PR-A+B mRNA的表達(dá)量為0.804±0.157。異位內(nèi)膜組PR-A+B mRNA的表達(dá)量與后兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P(0.01)，而在位內(nèi)膜組PR-A+B mRNA的表達(dá)量與正常內(nèi)膜組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。表明異位內(nèi)膜組織總孕激素受體表達(dá)量減少。 30例異位內(nèi)膜組織

12、中PR-B mRNA的表達(dá)量為0.037±0.009，13例正常內(nèi)膜組織中PR-B mRNA的表達(dá)量為0.629±0.090，6例在位內(nèi)膜組織中PR-B mRNA的表達(dá)量為0.639±0.156。異位內(nèi)膜組PR-B mRNA的表達(dá)量與在位內(nèi)膜組及正常內(nèi)膜組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P(0.01)，而后兩組PR-B mRNA的表達(dá)量比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2.3正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜組織中PR-B/PR-A+B

13、 mRNA比值的比較異位內(nèi)膜組織PR-B/PR-A+B mRNA的比值為0.421±0.029，在位內(nèi)膜組織PR-B/PR-A+B mRNA的比值為0.789±0.014，正常內(nèi)膜組織PR-B/PR-A+B mRNA的比值為0.756±0.027。異位內(nèi)膜組PR-B/PR-A+B的比值與后兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，說明異位內(nèi)膜組織中總PR減少以PR-B減少更明顯。后兩組PR-B/PR-A+B mRNA的比值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意

14、義(P>0.05)。 3.OB-R<,T>和OB—R<,L> mRNA在正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜組織中的表達(dá) 3.1 OB-R<,T>和OB-R<,L> mRNA在正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜組織的表達(dá)率 30例異位內(nèi)膜組織、6例在位內(nèi)膜組織和13例正常內(nèi)膜組織中均有OB-R<,T>mRNA和OB-R<,L>mRNA表達(dá)，兩種基因在三組中的表達(dá)率均為100％(30/30、6/6、13/13)。 3.2

15、 OB—R<,T>和OB-R<,L> mRNA在正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜組織中的表達(dá)量(OB-R<,T>/β-actin、OB-R<,L>/β-actin) 30例異位內(nèi)膜組織OB-R<,T> mRNA的表達(dá)量為0.105±0.015，13例正常內(nèi)膜組織OB-R<,T> mRNA的表達(dá)量為0.218±0.020，6例在位內(nèi)膜組織OB-R<,T> mRNA的表達(dá)量為0.208±0.010。異位內(nèi)膜組OB-R<,T> mRN

16、A的表達(dá)量與后兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，而在位內(nèi)膜組0B-R<,T> mRNA的表達(dá)量與正常內(nèi)膜組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 30例異位內(nèi)膜組織0B-R<,L> mRNA的表達(dá)量為0.054±0.010，13例正常內(nèi)膜組織OB-R<,L> mRNA的表達(dá)量為0.103±0.021，6例在位內(nèi)膜組織0B-R<,L> mRNA的表達(dá)量為0.107±0.009。異位內(nèi)膜組0B-R<,L> mRNA的表達(dá)量與

17、在位內(nèi)膜組和正常內(nèi)膜組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，而后兩組OB-R<,L>mRNA的表達(dá)量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 3.3 正常內(nèi)膜、在位內(nèi)膜及異位內(nèi)膜組織中0B-R<,L>/0B-R<,T>比值的比較 異位內(nèi)膜組織中長型瘦素受體占總瘦素受體的比例為0.515±0.070，在位內(nèi)膜組織中長型瘦素受體占總瘦素受體的比例為0.516±0.040，正常內(nèi)膜組織中長型瘦素受體占總瘦素受體的比例為0.46

18、9±0.077，三組之間0B-R<,L>/0B-R<,T>比值的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 4．研究組和對照組血清瘦素濃度的比較 研究組血清瘦素水平(8.906±2.222 ng/ml)與對照組(8.687±3.699 ng/ml)之間比較無顯著性差異(P>0.05)。研究組和對照組血清瘦素水平與BMI之間均成直線正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)分別為0.874、0.910(P<0.01)。 結(jié)論 1．異位內(nèi)

19、膜ER-α、ER-βmRNA的表達(dá)均顯著降低，說明異位內(nèi)膜對雌激素調(diào)節(jié)的反應(yīng)性降低；與ER-α相比較，ER-β在正常內(nèi)膜和異位內(nèi)膜的表達(dá)率和表達(dá)量都比較低，提示雌激素對正常內(nèi)膜和異位內(nèi)膜發(fā)揮調(diào)節(jié)作用以ER-α亞型為主。 2．異位內(nèi)膜PR-A+B、PR-B mRNA的表達(dá)顯著降低，且PR-B/PR-A+B mRNA比值顯著降低，說明異位內(nèi)膜總孕激素受體表達(dá)量減少以活性較強(qiáng)的B亞型減少為主。 3．異位內(nèi)膜OB-R<,L>和O