白細(xì)胞介素6及其受體在子宮內(nèi)膜異位癥中表達(dá)的研究.pdf

1、自然狀態(tài)下,IL-6R以膜結(jié)合受體(membrane binding interleukin 6 receptor,mlL-6R)和可溶性受體(soluble interleukin 6 receptor,sIL-6R)這兩種形式存在.與IL-6廣泛的生物學(xué)活性相一致,mIL-6R廣泛表達(dá)于多種組織細(xì)胞,包括EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞、髓樣白血病細(xì)胞、肝細(xì)胞、活化的B細(xì)胞和靜息的T細(xì)胞,人外周血單核細(xì)胞等.而sIL-6R存在于人的

2、尿液、血液以及其他體液中.在某些疾病狀態(tài)下,機(jī)體產(chǎn)生sIL-6R的水平顯著升高.目前認(rèn)為sIL-6R的產(chǎn)生機(jī)制有兩種:一是細(xì)胞膜上的mIL-6R經(jīng)蛋白酶水解脫落形成,二是體液中存在著編碼sIL-6R的mRNA. IL-6的多種生物學(xué)活性主要是通過其與相應(yīng)的mIL-6R結(jié)合所介導(dǎo)的,而sIL-6R卻具有獨(dú)特的生物學(xué)意義.大多數(shù)細(xì)胞因子的可溶性受體,如IL-2R、TNF-aR等,可與膜受體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合配體,作為配體的拮抗劑發(fā)揮生理與治療效應(yīng).然

3、而,sIL-6R與配體IL-6結(jié)合所形成的復(fù)合物仍具有生物學(xué)功能,可進(jìn)一步與IL-6受體的gp130結(jié)合并繼續(xù)發(fā)揮IL-6的生物學(xué)作用.由于表達(dá)gp130的組織細(xì)胞非常廣泛,而體液中sIL-6R能介導(dǎo)IL-6的生物學(xué)作用,這就擴(kuò)大了IL-6作用的組織細(xì)胞譜,從而更廣泛地發(fā)揮IL-6的多功能生物學(xué)作用.sIL-6R的這種介導(dǎo)增強(qiáng)IL-6的生物學(xué)意義,在機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)中可能具有重要意義. IL-6R及sIL-6R在Ems中意義的研究

4、很少,僅有的資料顯示, Ems患者可能通過下調(diào)子宮內(nèi)膜IL-6R的表達(dá),從而抵制了IL-6對(duì)子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞的生長抑制作用, IL-6的這種反應(yīng)性失調(diào)參與了Ems的發(fā)病機(jī)制.sIL-6R的效應(yīng)與IL-6相似,可抑制分泌期子宮內(nèi)膜的生長,其在Ems中的表達(dá),文獻(xiàn)報(bào)道極少且不一致.有作者報(bào)道Ems患者腹腔液和血中sIL-6R升高,但也有報(bào)道IL-6升高而sIL-6R下降,且與疾病的嚴(yán)重程度相關(guān),還有作者報(bào)道沒有改變. 目的

5、通過檢測(cè)Ems患者腹腔液中活化巨噬細(xì)胞及其表面mIL-6R的表達(dá),以及Ems患者腹腔液和血液中IL-6和sIL-6R的表達(dá), 探討IL-6及IL-6R在Ems的發(fā)病機(jī)制中的意義,深入研究IL-6在Ems發(fā)病機(jī)制中的作用機(jī)理,期望能為Ems的診治提供新的理論依據(jù). 材料與方法 1.研究對(duì)象:在浙大醫(yī)學(xué)院附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院經(jīng)腹腔鏡或組織學(xué)檢查確診為Ems的住院病人47例為Ems組,根據(jù)r-AFS分期分為即A組(I～I(xiàn)I期:19例

6、)和B組(III～Ⅳ期:28例).選擇同期經(jīng)腹腔鏡或組織學(xué)檢查確診為良性卵巢囊腫或先天性子宮畸形的患者22例為對(duì)照組. 2.樣本處理:手術(shù)前1天抽取外周靜脈血2ml,取上清血漿置.70-℃冰箱保存待測(cè).腹腔鏡直視下抽取未污染腹腔液,離心后取上清液置.70-℃冰箱保存待測(cè);沉淀細(xì)胞分離后提取巨噬細(xì)胞,制成巨噬細(xì)胞單細(xì)胞懸液待測(cè). 3.實(shí)驗(yàn)方法: 流式細(xì)胞法:CD14-FITC和CD126-PE分別標(biāo)記活化的巨噬細(xì)胞

7、和mIL-6R,流式細(xì)胞法檢測(cè)CD14<'+>、CD126<'+>及CD14<'+>/CD126<'+>的表達(dá).ELISA:檢測(cè)腹腔液和血漿中IL6和slL-6R含量. 4.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:腹腔液中IL6的含量差異大,非正態(tài)分布,取對(duì)數(shù)值處理后呈正態(tài)分布.所有數(shù)據(jù)以X±S表示,并通過方差齊性檢驗(yàn)(p>0.05).3組間比較采用ANOVA法,兩兩比較采用Student-Newman-Keuls法.所有數(shù)據(jù)采用SPSSl3.0軟件包進(jìn)行

8、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理.當(dāng)雙側(cè)檢驗(yàn)的p<0.05認(rèn)為有顯著性差異. 結(jié)果 1.Ems A組和B組腹腔液CD14<'+>、CD126<'+>及CD14<'+>/CD126<'+>的表達(dá)均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),其中Ems A組略高于Ems B組,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05). 2.腹腔液CD14<'+>、CD126<'+>及CD14<'+>/CD126<'+>的表達(dá)密切相關(guān),CD14<'+>與CD126<'+>,CD

9、14<'+>與CD14<'+>/CD126<'+>以及CD126<'+>與CD14<'+>/CD126<'+>之間均顯示明顯的直線相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為0.657,0.698和0.991.(p<0.05). 3. 對(duì)照組、Ems A組和Ems B組中CD126<'+>/CD14<'+>細(xì)胞占CD14<'+>細(xì)胞的百分率分別為81.74﹪,84.85﹪和85.867﹪,呈逐步上升趨勢(shì);而其占CD126<'+>細(xì)胞的百分率分別為98.

10、91﹪,98.86﹪和98.61﹪,均接近99﹪. 4.腹腔液中的IL-6含量Ems A組和Ems B組顯著高于對(duì)照組(P<0.05),而腹腔液中的sIL,-6R含量Ems B組顯著高于Ems A組和對(duì)照組(P<0.05). 5.血漿中的IL-6含量Ems B組顯著高于Ems A組和對(duì)照組(JF<0.05),而血漿中的sIL-6R含量Ems B組顯著低于Ems A組和對(duì)照組(P<0.05). 6.IL-6的含量升

11、高與腹腔液CD14<'+>、CD126<'+>及CD126<'+>/CD14<'+>表達(dá)的升高保持一致性,但無明顯的直線相關(guān)關(guān)系. 7.Ems B組患者腹腔液slL-6R含量升高,與腹腔液中IL-6含量的升高之間顯示不一致性. 8.Ems B組患者腹腔液slL-6R含量顯著高于A組和對(duì)照組(P<0.05),而其血漿中sIL-6R含量卻顯著低于A組和對(duì)照組(P<0.05),顯示一定的負(fù)性相關(guān)關(guān)系. 結(jié)論 1

12、.Ems患者腹腔液CD14<'+>表達(dá)顯著增加,提示巨噬細(xì)胞參與Ems的發(fā)生發(fā)展. 2.IL-6可能通過與腹腔液巨噬細(xì)胞膜表面的.mlL-6R結(jié)合來發(fā)揮其生物學(xué)作用. 3.活化的腹腔液巨噬細(xì)胞既是腹腔液IL6的主要來源細(xì)胞,又是IL-6的主要作用細(xì)胞,巨噬細(xì)胞可能通過自分泌的方式增加其分泌的IL-6,促進(jìn)了Ems的發(fā)生發(fā)展. 4.B組Ems患者腹腔液中sIL-6R明顯升高,提示腹腔液slL-6R參與Ems的發(fā)病機(jī)