應激QTL座位22個微衛(wèi)星標記以及MOR基因多態(tài)與豬運輸應激反應性狀關(guān)系的研究.pdf

1、本研究旨在分離鑒定豬運輸應激相關(guān)的遺傳標記或功能基因.選用兩種不同品種的豬，二花臉豬和皮特蘭豬，及其雜交后代為動物模型，對仔豬進行翻背測試，及對肥豬進行長途運輸應激.首先探討應激QTL的22個微衛(wèi)星標記與F2代(皮x二)豬運輸應激反應性狀(神經(jīng)內(nèi)分泌和肉質(zhì))和翻背評分之間的相關(guān)：然后檢測了純種二花臉豬和皮特蘭豬的mu-阿片受體基因(MOR)的多態(tài)性和MOR在垂體的mRNA水平，分析MOR基因的單核苷酸多態(tài)與應激性狀(包括翻背評分、運輸?shù)?/p>

2、血漿皮質(zhì)醇水平)的相關(guān)性.研究結(jié)果如下： 1.應激QTL的22個微衛(wèi)星標記與豬的翻背評分和運輸應激性狀的相關(guān)性分析 在以純種的皮特蘭豬和二花臉豬為親本建立的F2資源群體中選取52頭豬，對仔豬進行出生后第3、10和17d的翻背測試實驗(翻背評分分別記為BS3、BS10、BS17).測定運輸后的血漿應激和代謝相關(guān)激素水平：Insulin、ACTH、Cortisol、T3和T4；運輸結(jié)束后宰殺，測定6項肉質(zhì)指標：pH45min

3、、pH24h，嫩度，系水力、蒸煮損失和肉色評分(1*，a*，b*)；以上指標作為運輸應激性狀.在已知的應激性狀QTL座位區(qū)域內(nèi)選擇22個微衛(wèi)星標記，對各微衛(wèi)星標記的多態(tài)與翻背評分扣運輸應激性狀進行了相關(guān)性分析.結(jié)果表明： 各位點等位基因數(shù)為3—8個，雜合度為0.4155-0.7432，多態(tài)信息含量為0.3651～0.8150。 方差分析顯示：SW2446對BS3影響達到顯著水平(P<0.05)；SW2446(P<0.01

4、)、SW1816( P<0.05)和SW0092( P<0.05)對BS10有顯著影響；SW2108，SW1816和SW1023對BS17有顯著影響(P<0.05)；SW1808(P<0.01)和SW0320(P<0.05)對ACTH有顯著影響；SW1303對Insulin，SW1092對Cortisol，SW0320對T3，SO101對T4有顯著影響；S0101對肉色a*有極顯著影響(P<0.01)；SW1023對系水力有顯著影響(

5、P<0.05)；SW1808對系水力有極顯著影響(P<0.01)，對肉色1*、a*有顯著影響(P<0.05)；S0112和S0092對pH45min有顯著影響(P<0.05)。這些微衛(wèi)星標記對運輸應激性狀存在顯著影響。 2.MOR的多態(tài)性與豬的翻背測試和運輸應激血漿皮質(zhì)醇(Cortisol)水平的相關(guān)性分析 用PCR-SSCP方法對12頭純種皮特蘭豬和25頭純種二花臉豬MOR基因進行多態(tài)性分析，以GAPDH基-因為內(nèi)標，

6、用real time PCR法對MOR基-因的在垂體中的表達進行了相對定量分析，在仔豬出生后第3、10和17d進行翻背測試實驗，并于140-150日齡時對6頭皮特蘭豬和9頭二花臉豬進行2h運輸應激實驗，檢測運輸過程的-15(基礎(chǔ)水平)、0、15、30、60、120、和135min，共7個時間點的血漿Cortisol水平.分析MOR各基因型之間在垂體mRNA表達水平、“Backtest Score”和血漿Cortisol水平的差異。