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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
研究淫羊藿苷(Icariin,ICA)治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松(Postmenopausal osteoporosis,PMOP)的作用機(jī)制,探討其抗PMOP過程中與血清BGP、靶基因Fabp4 mRNA之間的關(guān)系,為闡述ICA治療PMOP提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
方法:
1.70只6m齡SD(Sprague-Dawley)雌性大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1w后,隨機(jī)分成假手術(shù)組(20只)和手術(shù)組(50只)。手術(shù)組切除大鼠雙側(cè)卵
2、巢,假手術(shù)組不切除卵巢只切開腹部,飼養(yǎng)16w后,經(jīng)雙能X線吸收測(cè)定法(Dual Energy X-ray Absorptiometry,DXA)測(cè)定股骨和第4、5腰椎的骨密度(Bone mineral destiny,BMD),以確定骨質(zhì)疏松(Osteoporosis,OP)模型復(fù)制成功。
2.模型確定復(fù)制成功后,將手術(shù)組分為給藥組和模型組,給藥組給予ICA,給藥劑量(125mg/kg·d),假手術(shù)組和模型組給予等量輔料——羧
3、溶性纖維素鈉(1mL)灌胃,1w灌胃6d,休息1d,灌胃12w后取材。
3.運(yùn)用生物力學(xué)(左脛骨三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)和第4腰椎壓縮試驗(yàn))實(shí)驗(yàn)方法,檢測(cè)各組大鼠骨強(qiáng)度(N)。
4.運(yùn)用Micro CT儀掃描大鼠右股骨及第5腰椎(每組隨機(jī)選取6根)。對(duì)同一標(biāo)本掃描獲得不同截面的圖片,并對(duì)骨組織進(jìn)行三維重建,使用MicroView軟件定量分析,分析參數(shù)包括骨體積(mm3),骨小梁厚度(um),骨小梁間隔(um),骨小梁數(shù)量(n)。
4、
5.運(yùn)用ELISA法檢測(cè)血清骨鈣素(Bone gIa protein,BGP)表達(dá)量(ng/L)。
6.運(yùn)用HE染色觀察各組病理切片。
7.采用qPCR檢測(cè)Fabp4 mRNA的表達(dá)量。
8.采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
結(jié)果:
1.手術(shù)組大鼠隨著月齡增高,體重明顯高于假手術(shù)組(P<0.05)。
2.16w后,手術(shù)組BMD明顯低于假手術(shù)組(P<0.
5、05)。
3.給予藥物ICA干預(yù)后,生物力學(xué)顯示給藥組的骨強(qiáng)度較模型組和假手術(shù)組增高(P<0.05)。
4.Micro CT顯示給藥組的骨微結(jié)構(gòu)較模型組和假手術(shù)組完整(P<0.05)。
5.給藥組血清骨鈣素含量高于模型組和假手術(shù)組(P<0.05)。
6.給藥組Fabp4 mRNA基因表達(dá)低于模型組(P<0.05)。
7.HE染色顯示給藥組與假手術(shù)組和模型組相比,骨小梁變厚,骨間隙變小。<
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