PTEN和P27在食管鱗狀細胞癌中的表達與意義.pdf

1、背景與目的
　　 食管癌是人類常見的惡性腫瘤，嚴重危害著人們的健康。其中約90％以上為鱗狀細胞癌。食管癌的發(fā)病率和死亡率有明顯的地區(qū)差異，中國為高發(fā)區(qū)，每年約有15萬人死于食管癌。流行病學資料顯示膳食亞硝酸鹽含量增高、缺乏維生素以及食物霉菌污染等可能與食管癌發(fā)生有關。隨著分子生物學的發(fā)展，發(fā)現食管癌的發(fā)生發(fā)展涉及到多個基因的改變，是癌基因的激活與抑癌基因失活長期協(xié)同作用的結果。因此研究食管癌的發(fā)病機制，對其進行預防和治療有著非常

2、重要的意義。
　　 PTEN(Phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten)，也稱MMAC1或TEP1，是1997年分別由三個研究小組定位克隆出一種新的抑癌基因，并從不同角度給出命名。PTEN通過去磷酸化參與細胞調控。PTEN編碼雙重底物特異性磷酸酶，具有蛋白磷酸酶活性和脂質磷酸酶活性，是第一個發(fā)現的具有雙重特異性磷酸酶活性的抑癌基因。PTEN通過去除3，4，

3、5-三磷酸磷脂酰肌醇(PIP3)3位上的磷酸基團；或使蛋白底物酸性蛋白多聚體脫磷酸，脫去多種促瘤生長因子介導的細胞內信號轉導途徑中的關鍵激酶的磷酸根，降低其磷酸化水平，以抑制細胞生長、粘附、轉化、鋪展及遷移，促進凋亡，從而對腫瘤生長、侵襲和轉移具有負性調控作用。PTEN的缺失或突變可以導致功能的失活。PTEN失活影響腫瘤發(fā)展的不同階段，PTEN基因的九個外顯子上均可發(fā)生突變，其突變率與某些腫瘤惡性度明顯相關。
　　 細胞周期是細

4、胞生命活動的基本過程。其調控有賴于細胞周期蛋白(cyclins)、細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑(CKIs)、細胞周期蛋白依賴性激酶(CDKs)組成的立體網絡調控系統(tǒng)。這個系統(tǒng)中任何組分的異常表達，都可以導致細胞的惡性增殖。P27又稱激酶抑制蛋白1.是細胞周期依賴性激酶抑制物( cyclin dependent kinase inhibitors，CDKI)家族的重要成員，是一新近發(fā)現的抑癌基因，它能與CDK結合并抑制其活性，進而負性調控

5、細胞周期進程，阻滯細胞周期G1由向S期轉換。是細胞周期的負性調控因子，P27的功能引起了廣泛的關注。
　　 目前國內外對PTEN、P27mRNA在食管鱗癌中的表達情況和相關性研究尚未見報道，兩者之間與食管鱗癌發(fā)生、發(fā)展，浸潤轉移之間的關系尚不十分清楚。為此，本實驗采用RT-PCR方法檢測食管鱗癌與癌旁組織中PTEN和P27mRNA的表達情況，探討兩者之間腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中的作用，并分析其之間的內在聯系，以期為研究食管癌發(fā)生、發(fā)展

6、機理及臨床治療提供實驗依據。
　　 材料與方法
　　 1.采集2009年1-6月份鄭州大學第二附屬醫(yī)院胸外科接受手術治療的部分食管癌患者，標本包括腫瘤組織60例及相應癌旁正常食管組織60例。全部病例有完整的臨床資料及明確的病理診斷，且術前均未行化療或放療。
　　 2.應用RT-PCR的方法檢測60例食管癌腫瘤組織及60例癌旁正常組織中PTEN、P27基因表達情況。并結合臨床病理特征，分析60例腫瘤組織中PTEN、

7、P27mRNA的表達與臨床病理特征的關系。
　　 3.應用spss10.0版軟件包，采用t檢驗、方差分析及Spearman相關分析進行統(tǒng)計學分析，α=0.05為檢驗水準。
　　 結果：
　　 1.癌組織中PTENmRNA的表達強度與癌旁正常組織表達的量分別為0.294±0.103和0.886±0.247(P＜0.05)。
　　 2.癌組織中P27mRNA的表達強度與癌旁正常組織表達的量分別為0.283±0

8、.127和0.894±0.336(P＜0.05)。
　　 3.PTENmRNA在有淋巴結轉移的食管癌組織中和無淋巴結轉移的食管癌組織中的表達分別為0.223±0.101、0.559±0.364(P＜0.05)。PTENmRNA在高分化組、中分化組、低分化組的表達分別為0.508±0.225、0.339±0.137、0.117±0.031（P＜0.05）；且PTENmRNA的表達強度與食管癌的TNM分期有關，隨著分期越晚，PTEN

9、的表達越弱，Ⅰ期＞Ⅱ期＞Ⅲ期(P＜0.05)。PTENmRNA的表達與患者的性別、年齡之間無明顯差異。
　　 4.P27mRNA在有淋巴結轉移的食管癌組織中和無淋巴結轉移的食管癌組織中的表達分別為0.319±0.117、0.624±0.265（P＜0.05）。P27mRNA在高分化組、中分化組、低分化組的表達分別為0.601±0.324、0.412±0.214、0.215±0.102（P＜0.05）；且P27mRNA的表達強度與

10、食管癌的TNM分期有關，隨著分期越晚，P27的表達越弱，Ⅰ期＞Ⅱ期＞Ⅲ期(P＜0.05)。P27mRNA的表達與患者的性別、年齡之間無明顯差異。
　　 5.Pearson相關性分析顯示，癌組織中PTENmRNA表達與P27mRNA表達之間呈正相關r=0.535(P＜0.05)。
　　 結論：
　　 1.PTENmRNA在正常組織中呈現為高表達，在食管鱗狀細胞癌呈現低表達，與食管癌分化程度、淋巴結轉移、臨床病理分期