三葉因子1對(duì)誘導(dǎo)性的ICAM1與VCAM1表達(dá)的影響.pdf

1、研究目的： 探討腫瘤壞死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α，TNF-α)刺激后胃黏膜上皮細(xì)胞GES-1細(xì)胞間粘附分子1(Intercellular adhesion molecule1，ICAM1)、血管細(xì)胞黏附分子1(Vascular cell adhesion molecule1，VCAM1)表達(dá)變化，以及TFF1(Trefoil factor family1，TFF1)過(guò)表達(dá)對(duì)GES-1細(xì)胞中TNF-

2、α誘導(dǎo)的ICAM1、VCAM1表達(dá)的影響。 研究方法： 以永生化的胃黏膜上皮細(xì)胞株GES-1為研究對(duì)象，采用不同濃度的人重組TNF-α刺激該細(xì)胞株，RT-PCR和Western Blot方法檢測(cè)不同時(shí)相ICAM1、VCAM1在mRNA和蛋白水平的表達(dá)變化；細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)刺激前后NF-κB(Nuclearf Factor-kappa B，NF-κB) p65蛋白的細(xì)胞定位情況。采用質(zhì)粒重組的方法構(gòu)建TFF1真核細(xì)胞表達(dá)質(zhì)

3、粒，將重組質(zhì)粒pIRES2-EGFP-TFF1瞬時(shí)轉(zhuǎn)染GES-1細(xì)胞，Western Blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后TNF-α誘導(dǎo)性ICAM1、VCAM1的表達(dá)變化。 研究結(jié)果： 1.TNF-α可誘導(dǎo)GES-1細(xì)胞表達(dá)ICAM1、VCAM1，隨著TNF-α濃度與誘導(dǎo)時(shí)間的增加，二者的表達(dá)量上調(diào)。 2.TNF-α刺激后GES-1細(xì)胞中NF-κB p65蛋白呈現(xiàn)出從細(xì)胞質(zhì)到細(xì)胞核的易位。 3.重組質(zhì)粒pIRES2-EG