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文檔簡介
1、目的:運用基因芯片技術(shù)對家兔半膜肌的固有亞部和副半膜肌背側(cè)亞部的全基因表達譜進行篩選,分析其表達變化的差異基因,以期了解骨骼肌兩型肌纖維之間的基因表達情況,為進一步研究兩型肌纖維的區(qū)別和肌纖維類型轉(zhuǎn)換的相關(guān)機制奠定基礎(chǔ)。
方法:實驗以10只成年家兔為研究對象,雌雄不限,其中5只用于基因芯片實驗,5只用于大體解剖和RT-PCR實驗。取家兔后肢右側(cè)半膜肌的固有半膜肌亞部和副半膜肌背側(cè)亞部進行實驗,運用基因芯片技術(shù)篩選兩個亞部全
2、基因表達譜的差異基因以及采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)分析MHC各亞型以及CaN、CaMKⅡα、AMPK等基因在兩亞部中的表達差異。
結(jié)果:
1、基因芯片檢測家兔半膜肌兩亞部中有4710條基因表達差異,其中去除未知基因名及其基因名相同的4423條基因,還剩下287條已知基因,其中168條上調(diào),119條下調(diào)。
2、家兔半膜肌兩個亞部中,固有半膜肌亞部只含有慢肌,表達MHCⅠ型,副半膜肌背
3、側(cè)亞部為快肌,表達MHCⅡb、MHCⅡx、少量MHCⅡa,同時兩亞部都表達CaN、CaMKⅡα、AMPK基因,但副半膜肌背側(cè)亞部的表達量明顯高于固有半膜肌亞部。
結(jié)論:
1、骨骼肌快肌纖維與慢肌纖維之間有4710條基因差異,去除未知名基因及基因名相同的4423條差異基因,共有287條已知基因差異表達,其中168條基因上調(diào),119條基因下調(diào)。這些基因涉及骨骼肌細胞的生物學(xué)過程、細胞組分、分子功能、物質(zhì)代謝等。<
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