酰氯法合成依曲替酸酰胺衍生物及4-氨基-2-三氟甲基苯基依曲替酸酯誘導(dǎo)白血病細(xì)胞分化的藥效學(xué)研究.pdf

1、目的：本研究以依曲替酸為母核，設(shè)計(jì)合成一系列依曲替酸酰胺衍生物，并以1HNMR，13CNMR和HR-MS 進(jìn)行結(jié)構(gòu)確認(rèn)，并對(duì)具有藥理學(xué)活性的4-氨基-2-三氟甲基苯基依曲替酸酯誘導(dǎo)白血病細(xì)胞分化的藥效學(xué)進(jìn)行研究。
　　 方法：
　　 1.以依曲替酸為母核，采用酰氯法，在極性端基部位引入含三氟甲基苯胺結(jié)構(gòu)的化合物，合成一系列新型依曲替酸酰胺衍生物。
　　 2.通過對(duì)本實(shí)驗(yàn)室已合成的依曲替酸衍生物進(jìn)行體外抗腫瘤活性實(shí)

2、驗(yàn)，結(jié)果表明4-氨基-2-三氟甲基苯基依曲替酸酯(ATPA)具有較好的藥理學(xué)活性。4-氨基-2-三氟甲基苯基依曲替酸酯作用于K562和NB4細(xì)胞后，通過MTT 法檢測(cè)細(xì)胞的增殖。
　　 瑞氏染色法在倒置相差顯微鏡下觀察加藥處理前后細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。采用細(xì)胞計(jì)數(shù)方法觀察白血病細(xì)胞在不同濃度的藥物作用下生長曲線的改變，NBT 還原實(shí)驗(yàn)法分析細(xì)胞在不同濃度作用下的分化指標(biāo)，F(xiàn)CM 檢測(cè)分析細(xì)胞周期及K562細(xì)胞表面分化抗原CD71和NB

3、4細(xì)胞表面分化抗原CD11b，CD13的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1.通過1HNMR，13CNMR和HR-MS進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，確認(rèn)了5種尚未見文獻(xiàn)報(bào)道的依曲替酸酰胺類衍生物的結(jié)構(gòu)。分別為N-(2-三氟甲基苯基)依曲替酰胺、N-(3-三氟甲基苯基)依曲替酰胺、N-(2-三氟甲氧基苯基)依曲替酰胺、N-(3-三氟甲氧基苯基)依曲替酰胺和N-(4-三氟甲氧基苯基)依曲替酰胺。具體結(jié)構(gòu)見表1。2.4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸

4、酯（ATPA）是抑制增殖和誘導(dǎo)分化活性較強(qiáng)的衍生物，進(jìn)行藥效學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，ATPA呈濃度依賴和時(shí)間性依賴抑制K562和NB4細(xì)胞增殖的作用。其誘導(dǎo)分化活性表現(xiàn)為油鏡下觀察白血病細(xì)胞向粒系分化成熟的改變，NBT陽性細(xì)胞率增加，NB4細(xì)胞表面分化抗原CD11b表達(dá)增加，CD13表達(dá)減少，作用與陽性對(duì)照依曲替酸相類似。并隨作用時(shí)間延長而變化加大。ATPA(10-5mol/L)作用3d后G0/G1期細(xì)胞表達(dá)量增加，S期細(xì)胞表達(dá)量減少，呈G1期阻滯