酰氯法合成依曲替酸酰胺衍生物及4-氨基-2-三氟甲基苯基依曲替酸酯誘導白血病細胞分化的藥效學研究.pdf

1、目的：本研究以依曲替酸為母核，設計合成一系列依曲替酸酰胺衍生物，并以1HNMR，13CNMR和HR-MS 進行結構確認，并對具有藥理學活性的4-氨基-2-三氟甲基苯基依曲替酸酯誘導白血病細胞分化的藥效學進行研究。
　　 方法：
　　 1.以依曲替酸為母核，采用酰氯法，在極性端基部位引入含三氟甲基苯胺結構的化合物，合成一系列新型依曲替酸酰胺衍生物。
　　 2.通過對本實驗室已合成的依曲替酸衍生物進行體外抗腫瘤活性實

2、驗，結果表明4-氨基-2-三氟甲基苯基依曲替酸酯(ATPA)具有較好的藥理學活性。4-氨基-2-三氟甲基苯基依曲替酸酯作用于K562和NB4細胞后，通過MTT 法檢測細胞的增殖。
　　 瑞氏染色法在倒置相差顯微鏡下觀察加藥處理前后細胞形態(tài)學變化。采用細胞計數方法觀察白血病細胞在不同濃度的藥物作用下生長曲線的改變，NBT 還原實驗法分析細胞在不同濃度作用下的分化指標，FCM 檢測分析細胞周期及K562細胞表面分化抗原CD71和NB

3、4細胞表面分化抗原CD11b，CD13的變化。
　　 結果：
　　 1.通過1HNMR，13CNMR和HR-MS進行結構鑒定，確認了5種尚未見文獻報道的依曲替酸酰胺類衍生物的結構。分別為N-(2-三氟甲基苯基)依曲替酰胺、N-(3-三氟甲基苯基)依曲替酰胺、N-(2-三氟甲氧基苯基)依曲替酰胺、N-(3-三氟甲氧基苯基)依曲替酰胺和N-(4-三氟甲氧基苯基)依曲替酰胺。具體結構見表1。2.4-氨基-2-三氟甲基苯基維甲酸

4、酯（ATPA）是抑制增殖和誘導分化活性較強的衍生物，進行藥效學研究發(fā)現，ATPA呈濃度依賴和時間性依賴抑制K562和NB4細胞增殖的作用。其誘導分化活性表現為油鏡下觀察白血病細胞向粒系分化成熟的改變，NBT陽性細胞率增加，NB4細胞表面分化抗原CD11b表達增加，CD13表達減少，作用與陽性對照依曲替酸相類似。并隨作用時間延長而變化加大。ATPA(10-5mol/L)作用3d后G0/G1期細胞表達量增加，S期細胞表達量減少，呈G1期阻滯