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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察麝香保心丸(Shexiang BaoxinWan,SXBXW)對(duì)由異丙腎上腺素(Isoproterenol,Iso)誘導(dǎo)肥大心肌細(xì)胞形態(tài)大小、增殖率及縫隙連接蛋白Cx43( connexin43,Cx43)表達(dá)的影響;通過(guò)在體實(shí)驗(yàn)觀察SXBXW對(duì)壓力后負(fù)荷所致心力衰竭大鼠的心肌重構(gòu)及對(duì)縫隙連接蛋白Cx43分布、表達(dá)的影響。
方法:1)體外實(shí)驗(yàn):將生長(zhǎng)良好的H9c2心肌細(xì)胞隨機(jī)分為對(duì)照組、ISO組、ISO+SXBXW組
2、,細(xì)胞培養(yǎng)48小時(shí)后用MTT法測(cè)定心肌細(xì)胞增殖率,細(xì)胞培養(yǎng)72小時(shí)后用相差顯微鏡測(cè)定心肌細(xì)胞表面積大小、BCA法測(cè)定蛋白濃度以及WB檢測(cè)Cx43表達(dá);
2)體內(nèi)實(shí)驗(yàn):取雄性SD大鼠30只,隨機(jī)分為假手術(shù)組(sham-operation, SO組),心衰組(Heart failure,HF組)、心衰+麝香保心丸組(Heart failure+SXBXW,HS組),各10只,采用腹主動(dòng)脈縮窄法建立大鼠心力衰竭模型,HS組用SXBX
3、W灌胃,而HF組和SO組則用自來(lái)水替代,共飼養(yǎng)12周后,行心臟B超檢查后處死大鼠,取左心室肌組織,用10%甲醛固定后,石蠟包埋,切片,經(jīng)HE染色觀察心肌形態(tài)結(jié)構(gòu),免疫組化法觀察 Cx43蛋白在左室心肌組織分布和表達(dá)、WB檢測(cè)Cx43在左室心肌組織的表達(dá)。
結(jié)果:1)成功構(gòu)建Iso誘導(dǎo)的肥大心肌細(xì)胞模型,與ISO組比較,ISO+SXBXW組心肌細(xì)胞表面積及蛋白含量減少,細(xì)胞增殖率增加,縫隙連接蛋白Cx43表達(dá)上調(diào)(P<0.05)
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