棘霉素在實體瘤小鼠模型中的藥物代謝動力學(xué)研究.pdf

1、棘霉素（echinomycin)是喹喔啉類抗生素的家族成員，是具有良好且廣泛的抗腫瘤活性的非核糖體肽（NRP）類的天然產(chǎn)物，其結(jié)構(gòu)除了有非核糖體肽酶（NRPS）合成的環(huán)肽骨架外，還具有兩個喹喔啉環(huán)生色團(tuán)。棘霉素正是通過這兩個扁平狀的喹喔啉環(huán)插入到DNA分子的堿基對之間，從而抑制了DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。正是因為這個性質(zhì)，棘霉素作為抗腫瘤藥物而被開發(fā)。近年來研究發(fā)現(xiàn)，棘霉素作為缺氧誘導(dǎo)因子（HIF1α）抑制劑，能夠通過優(yōu)先清除腫瘤干細(xì)胞的方式

2、有效地根除移植性小鼠模型中的淋巴瘤和急性髓細(xì)胞白血病，而對正常的造血干細(xì)胞沒有毒性。
　　基于棘霉素對液體瘤腫瘤干細(xì)胞的作用研究，本研究選用免疫缺陷小鼠 SCID CB-17，成功建立了實體瘤小鼠動物模型。將培養(yǎng)的乳腺癌細(xì)胞SUM149以每只小鼠100萬個細(xì)胞的劑量以手術(shù)方式注射到小鼠的乳房墊中，正常飼養(yǎng)6周左右，期間定期檢查小鼠的腫瘤生長狀況。結(jié)果顯示50只小鼠中只有1只術(shù)后死亡，可能是麻醉過量造成的，其余49只小鼠腫瘤生長良好

3、，且大小一致。
　　本研究首次建立了具有準(zhǔn)確性好、靈敏度高、簡單、快速、穩(wěn)定的用于檢測棘霉素的LC-MS/MS分析方法，方法學(xué)驗證表明該方法專屬性好，內(nèi)源性物質(zhì)不干擾棘霉素的測定；線性相關(guān)性好，相關(guān)系數(shù)大于0.99；低中高三個濃度的日間、日內(nèi)準(zhǔn)確度和精密性均在15％以內(nèi)。該方法的建立為棘霉素的檢測提供了參考意義。
　　本研究還對棘霉素在實體瘤小鼠模型中的藥代動力學(xué)進(jìn)行了研究。以尾靜脈注射方式給藥，給藥劑量為100ug/kg，

4、在給藥5min,10min,15min,30min,1h,2h,4h,6h,8h,16h和24h處死小鼠，并心臟采血，并迅速收集對應(yīng)時間點的腫瘤和其他器官組織，用于棘霉素生物樣品的LC-MS/MS分析，每個時間點3只小鼠。將棘霉素在實體瘤小鼠血漿中的濃度時間數(shù)據(jù)利用藥代動力學(xué)軟件Phoenix64計算進(jìn)行擬合，結(jié)果顯示棘霉素在小鼠體內(nèi)的過程符合二室模型，所得藥代動力學(xué)參數(shù)為分布半衰期t1/2(α)為0.042h；消除半衰期t1/2（β）