丹皮酚對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及對NMDA受體的影響.pdf

1、缺血性腦血管疾病是嚴(yán)重影響人類健康和生命的常見病、多發(fā)病。深入研究其發(fā)病機(jī)制，積極尋找有效防治藥物一直是人們研究的熱點(diǎn)。眾所周知，對于缺血性腦血管疾病，溶栓及腦保護(hù)治療仍然是當(dāng)今治療的兩大趨勢，而中藥及其有效成分在缺血性腦血管病治療中的作用正逐漸受到重視。丹皮酚(Paeonol，Pae)又稱牡丹酚，是毛茛科植物牡丹(Paeonia Suffruticosa Andr)根皮和蘿摩科植物徐長卿[nostelma Paniculatum(Bu

2、nge)K.Schum]干燥根或全草的主要有效單體成分。以往研究表明丹皮酚具有鎮(zhèn)靜、催眠、解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、抗菌等藥理作用，近幾年有研究報(bào)道表明，丹皮酚對腦缺血具有一定的保護(hù)作用，但未見丹皮酚對大鼠海馬神經(jīng)元缺糖缺氧再灌注損傷保護(hù)作用的報(bào)道。本研究旨在進(jìn)一步觀察丹皮酚對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用，并探討丹皮酚對大鼠海馬神經(jīng)元NMDA受體的影響，從一個(gè)方面闡明丹皮酚對腦缺血保護(hù)作用的作用機(jī)制。 本研究分兩部分，即大鼠腦缺血再

3、灌注損傷在體實(shí)驗(yàn)部分和大鼠神經(jīng)元原代離體培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)部分。第一部分觀察了丹皮酚對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、川芎嗪組(100mg·kg<'-1>)、丹皮酚高、中、低劑量組(150、100、50mg·kg<'-1>)；采用大腦中動(dòng)脈栓線阻斷法制備局灶性腦缺再灌注損傷模型(MCAO)，缺血2h，再灌注22 h。造模前預(yù)防性腹腔注射給藥3d、手術(shù)造模后2h及造模后12h再分別給藥1次。觀察缺血再灌注24h

4、后，大鼠神經(jīng)功能缺損評分、腦梗死體積測定、病理組織學(xué)變化、并采用分光光度法測定缺血側(cè)腦組織勻漿中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)和過氧化氫酶(CAT)的含量。結(jié)果表明，丹皮酚能降低MCAO模型大鼠的神經(jīng)功能缺損評分，縮小腦梗死體積，減輕腦缺血再灌注的病理組織損傷，升高缺血側(cè)腦組織中SOD、GSH-Px、CAT的含量，降低MDA的含量，與模型組比較具有顯著性差異(P<0.05)。提示丹皮酚對大鼠

5、局灶性腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)功能具有保護(hù)作用，其機(jī)制可能與其抗氧化損傷從而保護(hù)腦組織有關(guān)。第二部分通過采用大鼠神經(jīng)元原代離體培養(yǎng)，排除活體狀態(tài)下內(nèi)分泌、循環(huán)、體液等多種因素的影響，研究丹皮酚是否對腦內(nèi)單個(gè)神經(jīng)元有直接保護(hù)作用及其發(fā)揮作用的機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)選用大鼠的海馬神經(jīng)元作為研究對象，旨在動(dòng)態(tài)觀察具有NMDA受體的細(xì)胞受缺血缺氧的影響，其NMDA受體的變化和丹皮酚對其本身離子通道的影響。本實(shí)驗(yàn)動(dòng)態(tài)測定了缺糖缺氧再灌注損傷海馬神經(jīng)元存活率、

6、NMDA受體結(jié)合力及其NR1亞基mRNA表達(dá)、細(xì)胞興奮性氨基酸含量和神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)游離Ca<'2+>含量的改變；觀察了SOD、MDA及NO含量和NOS活性變化。結(jié)果表明：1.丹皮酚可減輕細(xì)胞形態(tài)的改變，顯著提高海馬神經(jīng)元的存活率，對缺糖缺氧神經(jīng)元發(fā)揮保護(hù)作用。2.丹皮酚通過減少海馬神經(jīng)元細(xì)胞谷氨酸含量，降低海馬神經(jīng)元NMDA受體活性，即與谷氨酸的結(jié)合力，抑制NMDA受體：NRl亞基mRN,A的表達(dá)，從而阻斷興奮性信息傳導(dǎo)途徑，減少細(xì)胞內(nèi)Ca