HPLC法檢測炎琥寧原料藥及其粉針劑方法學研究.pdf

1、炎琥寧為穿心蓮提取物，具有較強的抗病毒作用和市場前景，目前劑型為注射用炎琥寧。本實驗擬建立可用于檢測注射用炎琥寧的質(zhì)量體系。 根據(jù)所查閱文獻，選用紫外分光光度法進行注射用炎琥寧定量檢測，測得平均含量在99.5％-100％，RSD平均為0.19％,方法簡便快速并具可靠性。但紫外分光光度法為痕量檢測靈敏度高，對于純度要求很高的原料藥等并不適用。在非常規(guī)條件下產(chǎn)生穿心蓮內(nèi)酯在炎琥寧測定波長處有吸收，容易對炎琥寧檢測產(chǎn)生干擾，因此本實驗

2、研究使用HPLC法進行炎琥寧的含量檢測。 由于未見HPLC法測定炎琥寧相關(guān)研究報道，因此本實驗選用HPLC法測定炎琥寧類似物質(zhì)效果較好的五個流動相條件，分別用于炎琥寧系統(tǒng)適應性檢測，并改變流動相比例和pH值，結(jié)果在甲醇-0.05％磷酸二氫鉀溶液(pH值為2.5±0.05)(7：3)條件下測定效果最好，其理論塔版數(shù)為4812，峰型較好拖尾因子為1.02<1.05，與其他峰完全分離(分離度為2.75)，重復進樣檢測RSD=0.18％

3、，n=10。 使用以上HPLC條件測定炎琥寧原料藥。重復進樣6次測得含量平均值為103.16％，RSD為0.16％，方法重現(xiàn)性和樣品穩(wěn)定性較好。在40-300μg·ml-1范圍內(nèi)藥物濃度和峰面積呈良好的線性(r=0.9994 n=6)，平均回收率為99.84％，RSD=0.32％,方法準確度高，精確可靠。本藥物溶液在24小時內(nèi)穩(wěn)定峰面積的相對標準差RSD為0.25％。經(jīng)過破壞性實驗證明雜質(zhì)和降解物對本方法的實驗結(jié)果并無顯著影響。

4、對不同批次炎琥寧進行抽檢，測得含量檢測范圍在99.37％-100.31％ RSD=0.38％。符合HPLC法標準中的98％～102％，RSD≤2％的范圍，方法準確可靠，可作為注射用炎琥寧的檢測方法理論基礎(chǔ)。 按原料藥HPLC條件和方法測定注射用炎琥寧，輔料峰在主成分峰的檢測范圍以外出現(xiàn)，因此對檢測結(jié)果無影響。本HPLC條件最低檢測限約為0.0056μg·ml-1，藥物含量檢測和雜質(zhì)定量檢測靈敏度高，注射用炎琥寧在40-300μg

5、·ml-1內(nèi)，其峰面積和濃度線性回歸關(guān)系良好(r=0.9995 n=6)；平均回收率為99.73％，RSD=0.40％ n=6。本藥物溶液在24小時內(nèi)穩(wěn)定,峰面積的相對標準差RSD為0.25％，穩(wěn)定性好。將高溫試驗，氧化試驗，強酸試驗，強堿試驗結(jié)果與未破壞實驗對照，發(fā)現(xiàn)雖然注射用炎琥寧在各條件下不穩(wěn)定，但是分離度均大于1.5，降解產(chǎn)物峰與測定峰完全分離，因此使用本方法和條件檢測注射用炎琥寧的專屬性好。測得注射用炎琥寧含量范圍在99.5％