NeuroD對(duì)短暫缺氧性腦損傷模型小鼠的學(xué)習(xí)記憶功能及其腦內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞分化作用的影響.pdf

1、【目的】
　　模擬新生兒出生窒息,建立新生小鼠短暫缺氧性腦損傷模型,研究缺氧對(duì)新生鼠認(rèn)知功能的影響以及神經(jīng)源性分化因子(NeuroD)側(cè)腦室注射治療后神經(jīng)元再生情況,為新生兒圍產(chǎn)期窒息所致的缺氧缺血性腦病的防治研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　【方法】
　　1.參照Grojean的方法,新生5日齡(5d)小鼠短暫(10min)置于100％氮?dú)猸h(huán)境中,建立出生窒息的模型。采用神經(jīng)行為學(xué)觀察、HE染色觀察腦組織病理變化等方法,對(duì)動(dòng)物

2、模型進(jìn)行評(píng)價(jià)。
　　2.動(dòng)物(100只新生5d小鼠)隨機(jī)分成對(duì)照組、缺氧組、缺氧后側(cè)腦室給予NeuroD組、缺氧后側(cè)腦室給予NeuroD Control組,采用RT-PCR檢測(cè)NeuroD表達(dá)量的變化;第6d取材,采用快速冰凍切片的免疫熒光雙標(biāo)法檢測(cè)BrdU與Doublecortin表達(dá)的變化。
　　【結(jié)果】
　　1.缺氧過(guò)程新生小鼠均出現(xiàn)全身紫紺、四肢爬動(dòng)、意識(shí)障礙等神經(jīng)行為的異常。懸掛實(shí)驗(yàn)、懸崖逃避實(shí)驗(yàn)和Morri

3、s水迷宮實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),模型小鼠的智力下降和空間學(xué)習(xí)記憶功能減退。HE染色可見(jiàn)缺氧10min后海馬區(qū)神經(jīng)元損傷嚴(yán)重。
　　2.RT-PCR結(jié)果顯示,腦組織中可見(jiàn)NeuroD mRNA表達(dá),但各組間無(wú)明顯差異。
　　3.免疫熒光結(jié)果顯示,在大腦皮質(zhì)區(qū)和海馬齒狀回可見(jiàn)NeuroD表達(dá),但各組間無(wú)明顯差異。
　　【結(jié)論】
　　1.通過(guò)將新生小鼠短暫置于100%氮?dú)猸h(huán)境中的方法,可建立與人類(lèi)新生兒缺氧缺血性腦病相似的新生小鼠短