Exenatide對(duì)IL-1β和TNF-α誘導(dǎo)大鼠胰島β細(xì)胞凋亡的抑制作用.pdf

1、目的：
　　探討GLP-1受體激動(dòng)劑Exenatide對(duì)IL-1β和TNF-α誘導(dǎo)大鼠胰島β細(xì)胞凋亡的抑制作用。
　　方法：
　　采用膠原酶原位灌注、Ficoll不連續(xù)密度梯度離心分離純化大鼠胰島細(xì)胞，將純化胰島在體外進(jìn)行培養(yǎng)，根據(jù)培養(yǎng)基中是否加入Exenatide及細(xì)胞因子IL-1β和TNF-α，按隨機(jī)對(duì)照原則分為空白對(duì)照組，單獨(dú)Exenatide處理組（包括Exenatide10nmol/L、50nmol/L、10

2、0nmol/L的低、中、高劑量組，單獨(dú)細(xì)胞因子組(加IL-1β50u/ml和TNF-α250u/ml)及Exenatide+細(xì)胞因子組(Exenatide100nmol/L、IL-1β50u/ml、TNF-α250u/ml)。檢測(cè)指標(biāo)包括使用吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)雙染法免疫熒光顯微鏡下觀測(cè)各處理組胰島細(xì)胞的形態(tài)和凋亡情況，比較各組胰島細(xì)胞的存活率;ELISA方法測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)液的胰島素含量，計(jì)算葡萄糖刺激胰島素分泌實(shí)驗(yàn)中的胰島刺激

3、指數(shù)(SI)，評(píng)價(jià)胰島功能，觀察Exenatide對(duì)IL-1β、TNF-α誘導(dǎo)的胰島β細(xì)胞凋亡的抑制作用及促進(jìn)胰島素分泌的作用。
　　結(jié)果：
　　AO/PI雙染色證明Exenatide三個(gè)劑量處理組較空白組的胰島β細(xì)胞凋亡減少，存活率升高，（P均＜0.05），并呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系，在100nmol/L劑量時(shí)達(dá)到最高;單獨(dú)細(xì)胞因子處理組較空白對(duì)照組胰島細(xì)胞凋亡顯著增加(P＜0.05);而Exenatide+細(xì)胞因子聯(lián)合處理組中

4、β細(xì)胞的存活率明顯比單獨(dú)細(xì)胞因子組升高(P＜0.05)，但仍低于空白對(duì)照組(P＜0.05)。ELISA測(cè)定胰島素結(jié)果表現(xiàn)出跟胰島凋亡同樣的趨勢(shì)，其中Exenatide處理組在低糖及高糖刺激下的胰島分泌功能良好，胰島素分泌水平及刺激指數(shù)(SI)最高，空白對(duì)照組次之，細(xì)胞因子處理組胰島功能降低，胰島素分泌水平顯著低于對(duì)照組，刺激指數(shù)最小(1.85±0.19，P＜0.05)，而Exenatide+細(xì)胞因子聯(lián)合處理組與細(xì)胞因子組相比胰島分泌功能