特異生境真菌的抗真菌活性篩選和八個(gè)菌株的化學(xué)成分研究.pdf

1、真菌感染性疾病一直危害著人類的健康。在治療真菌感染的過程中,抗真菌藥物的發(fā)展過程經(jīng)歷了大約三個(gè)階段:早期以天然產(chǎn)物藥物灰黃霉素和兩性霉素為主;20世紀(jì)80年代后以唑類為代表的合成藥物是研究的熱點(diǎn);近幾年系統(tǒng)真菌感染在臨床發(fā)病率逐年增加、耐藥性病原真菌不斷出現(xiàn)的時(shí)候,echinocandins類藥物的上市和sordarins類化合物成為熱點(diǎn)預(yù)示著天然產(chǎn)物重新成為抗真菌藥物研究的重點(diǎn)。
　　 自然界天然產(chǎn)物數(shù)量巨大,種類繁多,在生命

2、過程中起著生理調(diào)節(jié)、信號(hào)傳遞以及化學(xué)防御等重要作用,而且有活性的天然產(chǎn)物又是藥物開發(fā)的重要資源。真菌是能夠產(chǎn)生新結(jié)構(gòu)天然產(chǎn)物的重要生物類群之一。特異環(huán)境真菌,包括海洋真菌和植物內(nèi)生真菌等,由于其特殊的生存環(huán)境可以產(chǎn)生結(jié)構(gòu)獨(dú)特,骨架新穎的次生代謝產(chǎn)物,近年來已成為發(fā)現(xiàn)新藥物或者先導(dǎo)化合物的重要資源,備受科研工作者的關(guān)注。
　　 本文以本課題組保藏的204株海洋真菌和植物內(nèi)生真菌為研究對(duì)象,進(jìn)行少量發(fā)酵,對(duì)其提取物進(jìn)行抗真菌(白色假

3、絲酵母)活性的測定,挑選出60個(gè)具抗真菌活性的菌株。結(jié)合菌落形態(tài),抗真菌活性以及提取物薄層層析顯色等特征將這些菌株分為29組。選取活性最好類別不同的4個(gè)菌株AF119、AF219、AF228、AF251和4個(gè)其他菌株C56、D-20、TF-5、XZ-53進(jìn)行發(fā)酵,對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)的分離純化,并利用核磁共振、質(zhì)譜、紫外光譜、紅外光譜、旋光和X-射線單晶衍射等方法對(duì)得到的純化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。共分離鑒定了3個(gè)具顯著抗真菌活性的化合物和其

4、他57個(gè)純化合物,其中有23個(gè)新化合物。初步研究了部分化合物的生物活性。
　　 從C56菌株固體發(fā)酵產(chǎn)物中分離并鑒定了8個(gè)化合物,包括6個(gè)brefeldin A類型的大環(huán)內(nèi)酯類化合物(其中1個(gè)新化合物),1個(gè)吲哚二萜化合物和1個(gè)二酮哌嗪雜合萜化合物。BrefeldinA有很強(qiáng)的抗菌、抗腫瘤活性,對(duì)其衍生物和抗腫瘤作用機(jī)制的研究一直都在進(jìn)行,有望開發(fā)為抗腫瘤藥物。后二者是一類真菌毒素,能夠引起哺乳動(dòng)物的震顫麻痹。
　　 從

5、AF119和AF251菌株固體發(fā)酵產(chǎn)物中分離并鑒定了13個(gè)化合物,8個(gè)對(duì)三聯(lián)苯類化合物及其衍生物,1個(gè)環(huán)七肽化合物,2個(gè)含氯黃酮類化合物和2個(gè)二苯醚類化合物。MTT實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞儀測定表明對(duì)聯(lián)苯類化合物對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖有較強(qiáng)的抑制作用,主要表現(xiàn)為細(xì)胞周期延緩,最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
　　 從AF228菌株固體發(fā)酵產(chǎn)物中活性追蹤分離到1個(gè)抗真菌活性化合物霉酚酸,并得到其晶體結(jié)構(gòu)。
　　 從AF219菌株固體發(fā)酵產(chǎn)物中活性追蹤分離

6、到一個(gè)抗真菌活性很強(qiáng)的化合物aspirochlorine,同時(shí)還分離鑒定出9個(gè)其他化合物,包括萜類、二酮哌嗪、苯并呋喃酮等。其中有1個(gè)新結(jié)構(gòu)的二萜化合物。
　　 從D-20菌株固體發(fā)酵產(chǎn)物中分離并鑒定了5個(gè)化合物,4個(gè)倍半萜和1個(gè)化合物雙酚A。其中2個(gè)菖蒲二烯結(jié)構(gòu)的倍半萜是新化合物。
　　 從XZ-53菌株固體發(fā)酵產(chǎn)物中離并鑒定了3個(gè)化合物,2個(gè)聚酮化合物和1個(gè)聚酮雜合萜化合物,其中1個(gè)聚酮是新化合物。
　　 從