基于氨基苯硼酸自組裝的可逆糖蛋白腫瘤標志物免疫傳感器的研究.pdf

1、電化學免疫傳感器是將免疫技術(shù)和電化學檢測方法結(jié)合起來的一種標記免疫分析傳感器，利用多種方法將腫瘤相關(guān)抗原／抗體固定在電極表面，通過固定化的分子識別物質(zhì)和分析物或標志物之間的免疫反應，把抗原和抗體結(jié)合的信息轉(zhuǎn)變?yōu)榭梢詸z測的電化學信號(電流或電位等)，實現(xiàn)腫瘤細胞因子的快速、靈敏、準確檢測。 本論文利用硼酸自組裝單層與糖化蛋白質(zhì)分子間的特定相互作用，發(fā)展了兩種可重復使用的安培免疫傳感器。該傳感器通過在金絲電極表面自組裝APBA-MU

2、A／MU雜合單層，并進一步利用硼酸基團與糖化蛋白質(zhì)分子中的糖殘基的相互作用將酶標記的癌胚抗體CEA和前列腺特異性抗體PSA吸附在電極表面。循環(huán)伏安(CV)、電化學阻抗(EIS)、蛋白質(zhì)光活性試驗和表面等離子體共振(SPR)測量證明利用自組裝技術(shù)可在金電極表面形成致密的硼酸單層，該單層可通過硼酸基團與糖分子的特定相互作用識別糖化蛋白質(zhì)抗體，并進一步識別其抗原形成免疫配合物，使電極的電化學阻抗增加，對H2O2還原的催化響應降低。此外，該糖化

3、蛋白質(zhì)與硼酸基團的識別作用是可逆的，在偏酸性條件或有山梨醇存在的條件下，糖化蛋白質(zhì)抗體能夠從硼酸單層上剝離下來，該傳感器可進一步識別抗體并與其抗原生成免疫配合物，位傳感器可重復使用，對CEA傳感器重生四次標準偏差為7.1％，對PSA傳感器重生十次標準偏差為3.3％(S／N=3)。同時研究了免疫檢測條件如溫育時間、溫度、測定液pH值等對安培測定的影響，最佳實驗條件下CEA抗原、PSA抗原的線性檢測范圍分別為2.0～40.0ng mL-1，