異源冷凍精子誘導(dǎo)大菱鲆和大西洋牙鲆雌核發(fā)育的研究.pdf

1、本文探索了異源冷凍精子誘導(dǎo)大菱鲆(Scophthalmus maximus)和大西洋牙鲆(Paralichthys dentatus)雌核發(fā)育的條件，建立了采用冷凍保存的鱸魚(Lateolabrax japonicus)精液誘導(dǎo)這幾種海水魚類雌核發(fā)育的方法，并采用不同的方法對雌核發(fā)育后代做了分析鑒定。為大規(guī)模培育這幾種魚的全雌菌種奠定了基礎(chǔ)。研究結(jié)果如下： 1.鱸魚精子，不管是否經(jīng)過紫外線照射處理，都可以刺激大菱鲆卵開始胚胎發(fā)育

2、過程，并且兩組卵的胚胎發(fā)育過程完全相同。卵在(13±0.2)℃海水中大約95小時至出膜前期。由于沒有經(jīng)過染色體加倍化處理，兩組胚胎均發(fā)育畸形，呈現(xiàn)出典型的單倍體綜合癥。實驗組未發(fā)現(xiàn)有正常形態(tài)的仔魚。從而確定，鱸魚精子與大菱鲆卵子雜交所得后代即為大菱鲆的單倍體。通過對雌核發(fā)育冷休克起始時間，冷休克溫度和冷休克持續(xù)時間的篩選和優(yōu)化，確定了利用鱸魚未滅活精子誘導(dǎo)大菱鲆卵雌核發(fā)育的最佳條件是：在13℃下授精6min后，用(-1～0)℃的海水對卵

3、進行持續(xù)25min的冷休克處理。對孵出的仔魚養(yǎng)殖5到7天，單倍體苗會全部死掉，剩下的正常形態(tài)苗種即為大菱鲆雌核二倍體。比較正常二倍體、單倍體和人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育二倍體胚胎的發(fā)育速度和形態(tài)學(xué)特征，結(jié)果表明，不同胚胎發(fā)育速度有明顯區(qū)別，表現(xiàn)為：正常二倍體和單倍體>人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育二倍體。形態(tài)學(xué)上單倍體胚胎表現(xiàn)為頭小，尾短，活動能力弱，破膜困難，人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育二倍體胚胎則同正常二倍體胚胎同期特征一致。 2.使用鱸魚精子經(jīng)紫外照射滅活后