促進(jìn)造血干細(xì)胞增殖與血紅蛋白合成營(yíng)養(yǎng)組合物的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 以乙酰苯肼、X射線、環(huán)磷酰胺聯(lián)合應(yīng)用的方法建立小鼠再生障礙性貧血?jiǎng)游锬Ｐ?，用以評(píng)價(jià)促進(jìn)造血干細(xì)胞增殖與血紅蛋白合成營(yíng)養(yǎng)組合物對(duì)小鼠再生障礙性貧血造血功能的影響。 方法： BALB/c小鼠100只，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為：正常對(duì)照組、再障模型組及不同劑量的營(yíng)養(yǎng)組合物組。采用皮下注射乙酰苯肼100mg/kg，次日X射線2.0Gy照射后，于試驗(yàn)第5天環(huán)磷酰胺80 mg/Kg腹腔注射，第15天重復(fù)以上步驟但不

2、給予射線處理的方法建立再生障礙性貧血小鼠模型，以鉛磚屏蔽施以假照射及單純等量生理鹽水相應(yīng)部位注射為正常對(duì)照組。試驗(yàn)第7天開(kāi)始，營(yíng)養(yǎng)組合物高、中、低劑量組小鼠每天灌胃，分別給予1445.55，963.7，674.59 mg/(kg·d)營(yíng)養(yǎng)組合物，直至第45天，頸椎脫臼法處死小鼠，觀察試驗(yàn)小鼠的血象、骨髓象、造血細(xì)胞內(nèi)的線粒體、造血干細(xì)胞集落的形成及肝臟、脾臟的病理變化。 結(jié)果： 1．試驗(yàn)第7天，與正常對(duì)照組比較，其余各組

3、小鼠陸續(xù)出現(xiàn)皮毛凌亂，光澤度降低，反應(yīng)遲鈍，行動(dòng)遲緩，飲食量減少，其中以再障模型組最為明顯，不同劑量的營(yíng)養(yǎng)組合物組與再障模型組比較，小鼠精神狀態(tài)漸佳，進(jìn)食量增大。此外，再障模型組小鼠體重與正常對(duì)照組相比下降明顯(*p<0.05)。各營(yíng)養(yǎng)組合物組體重較模型對(duì)照組明顯增高(*p<0.05)。 2．與正常對(duì)照組比較，再障模型組小鼠外周血象三系細(xì)胞顯著降低(*p<0.01)；與再障模型組比較，營(yíng)養(yǎng)組合物高、中、低劑量組均能顯著提高再障小

4、鼠外周血象三系細(xì)胞水平(*p<0.01)。外周血涂片顯示，與正常對(duì)照組相比，再障模型組小鼠白細(xì)胞減少，其中以中性粒細(xì)胞減少尤為明顯，而淋巴細(xì)胞比例相對(duì)增多；不同劑量的營(yíng)養(yǎng)組合物組與正常對(duì)照組則無(wú)顯著性差異(*p<0.05)。再障模型組小鼠促紅細(xì)胞生成素(EPO)含量明顯高于正常對(duì)照組，且EPO與RBC、 Hb均呈負(fù)相關(guān)。而不同劑量的營(yíng)養(yǎng)組合物組與再障模型組比較，促紅細(xì)胞生成素(EPO)由于代償作用含量降低(*p<0.01)；并呈劑量-效

5、應(yīng)關(guān)系。 3．再障模型組小鼠骨髓有核細(xì)胞數(shù)與正常對(duì)照比較，顯著減少(*p<0.01)；與再障模型組的骨髓有核細(xì)胞數(shù)比較，營(yíng)養(yǎng)組合物各劑量組骨髓有核細(xì)胞數(shù)增加(*p<0.05)。骨髓透射電鏡顯示，不同劑量的營(yíng)養(yǎng)組合物組與再障模型組比較，同類造血細(xì)胞內(nèi)線粒體數(shù)目明顯增多(*p<0.01)。 4．造血干細(xì)胞集落實(shí)驗(yàn)證明，再障模型組小鼠造血干細(xì)胞集落的數(shù)量明顯減少，與正常對(duì)照組比較差異顯著(*p<0.01)：營(yíng)養(yǎng)組合物高、中、低

6、劑量組干細(xì)胞集落形成率均明顯高于再障組(*p<0.01)，且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。 5．肝、脾的病理切片顯示，再障模型組小鼠肝臟組織水腫明顯，小葉結(jié)構(gòu)欠清晰，肝血竇及中央靜脈擴(kuò)張、充血；脾組織結(jié)構(gòu)疏松，脾小體個(gè)數(shù)減少。不同劑量的營(yíng)養(yǎng)組合物組與再障模型組相比，肝臟組織水腫減輕，小葉結(jié)構(gòu)明顯清晰，肝細(xì)胞形態(tài)正常；脾臟雖仍有部分充血，但脾小體個(gè)數(shù)較再障模型組明顯增多。 結(jié)論： 1．采用乙酰苯肼、X射線、環(huán)磷酰胺聯(lián)合應(yīng)用的方