慢性腎衰對脂肪組織腎素-血管緊張素系統(tǒng)的活化及機制.pdf

1、第一部分慢性腎衰對脂肪組織腎素—血管緊張素系統(tǒng)的活化及機制
　　 研究背景:
　　 慢性腎功能不全(CRF)是一種慢性炎癥性疾病，脂肪組織是其炎癥反應的一個主要來源。脂肪組織不僅是機體重要的能量儲存場所，而且還可以合成和分泌大量的脂肪因子，如細胞因子、急性期反應蛋白、趨化因子等。研究發(fā)現:慢性腎功能不全時，脂肪組織釋放大量的脂肪因子，引起全身炎癥反應和氧化應激，進而促進了慢性腎衰一系列并發(fā)癥的發(fā)生。
　　 長期以

2、來，人們認為腎素—血管緊張素系統(tǒng)(RAS)僅調節(jié)著收縮壓和腎臟電解質的平衡，但近些年研究發(fā)現，腎素—血管緊張素系統(tǒng)的多種成分也表達于多種組織中，如:腎上腺、腎臟、腦、心臟和血管中。局部RAS可通過調節(jié)基因表達、促進增生、纖維化及炎癥反應，進而調節(jié)局部器官的生理學功能。自1987年研究發(fā)現大鼠主動脈周圍脂肪組織有AGTmRNA的表達后，大量關于脂肪組織局部亦表達RAS的研究開展起來。研究發(fā)現，大鼠和人的脂肪組織中表達合成血管緊張素Ⅱ所需的

3、所有成分，包括血管緊張素原(AGT)、血管緊張素轉化酶(ACE)和血管緊張素Ⅰ型受體(AT1)等。進一步的研究還證實，局部RAS可影響脂肪組織的生物學活性和代謝功能，如:血管緊張素Ⅱ通過與其受體結合，可以抑制脂質分解和促進脂質合成，進而促進了脂肪組織脂質的蓄積;血管緊張素Ⅱ抑制前脂肪細胞的分化，減少脂肪細胞的數量，促進脂肪細胞的肥大;血管緊張素Ⅱ還促進炎癥因子的釋放，引起脂肪組織炎癥反應和重塑。局部腎素—血管緊張素系統(tǒng)不僅對脂肪組織局部

4、發(fā)揮著重要作用，對機體全身也產生著巨大影響，如引起脂質代謝異常、高血壓、胰島素抵抗和其他部位炎癥性疾病，包括動脈粥樣硬化、炎癥性肺疾病、腎衰竭和腫瘤等。
　　 我們之前的研究已發(fā)現慢性腎衰時脂肪組織存在明顯的炎癥反應，但其具體機制尚不清楚。為探討脂肪組織的RAS是否參與此過程，我們首先測定了慢性腎衰時脂肪組織RAS的表達情況。
　　 4—羥基2—壬烯（HNE）是脂質過氧化的終末產物，在終末期腎衰的病人中常升高;本實驗室也

5、已證實慢性腎衰大鼠皮下和內臟脂肪組織高表達HNE蛋白。脂肪細胞HNE的蓄積可引起脂聯素的合成減少及慢性炎癥的發(fā)生。研究證實，HNE可以促進Toll樣受體(TLRs)的表達，引起一系列的病理改變;終末期腎衰病人單核細胞和白細胞中TLRs表達也增多，那么慢性腎衰時，HNE是否通過TLRs引起RAS活化尚不清楚。
　　 體內實驗，5/6腎切除大鼠作為慢性腎功能衰竭模型，觀察脂肪組織是否存在腎素—血管緊張素系統(tǒng)的活化。目的在于探討慢性腎

6、衰時脂肪組織炎癥反應的發(fā)生機制。
　　 體外實驗，用HNE刺激3T3-L1脂肪細胞，觀察HNE是否可誘導腎素—血管緊張素系統(tǒng)的活化;阻斷TLRs的表達，觀察HNE刺激RAS的活化是否受抑制，即探討HNE活化RAS的可能機制。
　　 研究方法:
　　 體內部分:
　　 一、二步法5/6腎切除建立慢性腎衰模型
　　 1)腹腔注射麻醉大鼠:給大鼠腹腔注射3％戊巴比妥鈉麻醉，俯臥位定于鼠臺上。
　　

7、 2)酒精消毒，于大鼠左腹部中1/3脊柱旁開2-3cm處行縱行切口，切口長度約為2-3cm。
　　 3)依次切開皮膚和皮下組織，并剪開肌肉暴露腎臟，剝離腎包膜，用無損傷血管鉗夾住腎蒂，切除腎臟的上下極約占左腎的2/3，明膠海綿壓緊上下極創(chuàng)面止血，放松血管鉗，觀察創(chuàng)面不再滲血后還納腎臟回腹腔，逐層縫合肌層及皮膚，酒精消毒手術切口?？p合前，腹腔內滴注青霉素注射液，預防感染。假手術組只做腎包膜剝離術。
　　 4)一周后，在脊

8、柱右側中1/3旁開2-3cm縱行切口（切口略高于左側），分離肌層，游離腎臟，無損傷血管鉗夾住腎蒂，4號絲線結扎腎蒂，切除右側腎臟，觀察有無出血，縫合肌層和皮膚，酒精消毒手術切口。假手術組只做腎包膜剝離術。
　　 二、大鼠血、尿和脂肪組織的留取及處理
　　 1)術后第16周，測定大鼠血壓后將大鼠放于代謝籠中，留取24小時尿。
　　 2)腹腔注射麻醉大鼠:給大鼠腹腔注射3％戊巴比妥鈉麻醉，仰臥位固定于鼠臺上
　

9、　 3)腹主動脈采血后，采用放血法處死大鼠。
　　 4)酒精消毒皮膚，分離附睪和腹膜后脂肪墊（內臟脂肪）及腹股溝脂肪墊（皮下脂肪），迅速放入盛有1×PBS(PH7.4)的培養(yǎng)皿中。
　　 5)PBS反復清洗脂肪墊，剔除肉眼可見的血管，將脂肪墊剪成小塊，包于錫箔紙中，液氮速凍，-80℃保存。
　　 三、脂肪組織腎素(—)血管緊張素系統(tǒng)指標AT1蛋白活性的檢測
　　 Sham組和CRF組大鼠皮下和內臟脂肪組

10、織，按組織重量:裂解液=1:4的比例用勻漿器反復上下勻漿，以上操作均在冰上進行，勻漿完全后，13000g，4℃離心40min，去掉漂浮于上層的脂滴，提取中間層的勻漿液，即為脂肪組織的總蛋白，加入SDS(5×)上樣緩沖液，95℃煮沸蛋白，Western Blotting檢測脂肪組織AT1蛋白的活性。
　　 四、real-time PCR檢測皮下和內臟脂肪組織腎素—血管緊張素系統(tǒng)AGT、ACE、AT1的表達
　　 Sham組

11、和CRF組大鼠皮下和內臟脂肪組織液氮砸碎，按組織重量:TRIZOL=1:10的比例勻漿，提取組織RNA，逆轉錄，qRT-PCR檢測AGT、ACE、AT1的表達。
　　 五、統(tǒng)計方法
　　 所有數據均代表3次以上重復實驗的結果，以均數±標準差表示，所有統(tǒng)計分析由統(tǒng)計軟件SPSS13.0完成。與常數項比較，采用單樣本t檢驗;兩樣本均數的比較采用兩獨立樣本t檢驗。p＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 體外部分:

12、>　　 一、3T3-L1前脂肪細胞的培養(yǎng)和誘導分化
　　 3T3-L1前脂肪細胞采用美國ATCC細胞株。復蘇后在37℃，5％CO2，10％FBS的高糖DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)，傳代。細胞狀態(tài)良好時接種于培養(yǎng)板，待細胞生長至融合2d后，加含0.5mmol/L異丁基-3-甲基黃嘌呤、0.25umol/L地塞米松、10ug/ml胰島素和10％FBS的含糖DMEM(4.5mg/L)培養(yǎng)48h，隨后以含10％FBS的含糖DMEM(4.5mg

13、/L)培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，每隔48h換1次培養(yǎng)液，誘導分化8-10d的3T3-L1細胞95％以上呈脂肪細胞表型。實驗前改換用不含FBS的DMEM中繼續(xù)培養(yǎng)過夜，使細胞處于同步生長狀態(tài)，然后用于實驗。
　　 二、HNE誘導脂肪細胞表達腎素-血管緊張素系統(tǒng)的時間、濃度效應
　　 脂肪細胞分別與5、10、20、40umol/L HNE或DMSO共同孵育0、4、8、16、24小時，收集細胞提取RNA，qRT-PCR檢測AGT、ACE

14、、AT1的表達。
　　 三、TLR2和TLR4siRNA干擾后HNE刺激，脂肪細胞腎素-血管緊張素系統(tǒng)表達的測定
　　 脂肪細胞誘導分化第7天，加入TLR2和TLR4siRNA，有效干擾后，加入HNE（40umol/L），16h后收集細胞，提取總RNA，qRT-PCR檢測AGT、ACE、AT1的表達。
　　 四、統(tǒng)計方法
　　 所有數據均代表3次以上重復實驗的結果，以均數±標準差表示，所有統(tǒng)計分析由統(tǒng)計軟

15、件SPSS13.0完成。與常數項比較，采用單樣本t檢驗;方差齊的多個樣本均數的比較采用One-Way ANOVA，兩兩比較采用LSD法;方差不齊的多個樣本均數的比較采用Welch法，兩兩比較采用Dunnett's T3法。p＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果:
　　 體內部分:
　　 一、腎衰大鼠模型的確立
　　 在二步法5/6腎切除術后的第16周，采集大鼠尿液和血液測定血肌酐和肌酐清除率。在第1

16、6周時，腎衰組大鼠體重和肌酐清除率與假手術組相比顯著減少(p＜0.001)，而血肌酐和血壓水平顯著升高(p＜0.001)。
　　 二、慢性腎衰對腎素—血管緊張素系統(tǒng)的影響
　　 1、慢性腎衰促進皮下和內臟脂肪AGT、ACE、AT1mRNA的表達
　　 CRF組AGT、ACE、AT1mRNA的表達水平與假手術組相比顯著性升高（皮下AGT:t=7.877,p=0.016; ACE:t=9.915,p=0.010; A

17、T1:t=10.757,p=0.009;內臟AGT:t=10.459, p=0.009; ACE:t=11.218,p=0.008; AT1:t=12.884,p=0.006)。
　　 2、慢性腎衰促進皮下和內臟脂肪AT1蛋白的表達
　　 CRF組AGT、ACE、AT1蛋白的表達水平與假手術組相比顯著性升高(p＜0.01)。
　　 結論:
　　 慢性腎衰大鼠皮下和內臟脂肪組織腎素—血管緊張素系統(tǒng)活化。

18、r>　　 體外部分:
　　 一、HNE對脂肪細胞腎素—血管緊張素系統(tǒng)表達的影響
　　 HNE以劑量依賴的方式上調脂肪細胞（3T3-L1細胞）AGT、ACE、AT1m的表達，并在40umol/L時達最高(AGT:F=16.254，p＜0.001，ACE:F=13.486，p＜0.01，AT1:F=14.252，p＜0.001);同時HNE以時間依賴的方式上調3T3-L1細胞AGT、ACE、AT1mRNA的表達，刺激16小

19、時AGT、ACE、AT1mRNA的表達最高( AGT:F=14.754，p＜0.001，ACE:F=11.837，p＜0.01，AT1:F=13.925，p＜0.001)。
　　 二、TLR2 siRNA對HNE誘導脂肪細胞腎素—血管緊張素系統(tǒng)活化的影響
　　 1、TLR2 siRNA抑制3T3-L1細胞TLR2受體的表達
　　 TLR2 siRNA可以有效地抑制3T3-L1細胞TLR2mRNA和蛋白的表達(p＜

20、0.05)。
　　 2、TLR2 siRNA抑制了HNE對3T3-L1細胞腎素-血管緊張素系統(tǒng)活性的影響
　　 TLR2 siRNA干擾3T3-L1細胞后，HNE對3T3-L1細胞AGT、ACE、AT1mRNA表達的上調作用被抑制(p＜0.05)。
　　 三、TLR4 siRNA抑制HNE誘導脂肪細胞腎素—血管緊張素系統(tǒng)指標的表達
　　 1、TLR4 siRNA抑制3T3-L1細胞TLR4受體的表達

21、>　　 TLR4 siRNA可以有效地抑制3T3-L1細胞TLR4mRNA和蛋白的表達(p＜0.05)。
　　 2、TLR4 siRNA抑制了HNE對3T3-L1細胞腎素-血管緊張素系統(tǒng)活性的影響
　　 TLR4 siRNA干擾3T3-L1細胞后，HNE對3T3-L1細胞AGT、ACE、AT1mRNA表達的上調作用被抑制(p＜0.05)。
　　 結論:
　　 1、HNE以時間劑量依賴方式上調脂肪細胞腎素

22、-血管緊張素系統(tǒng)的表達
　　 2、TLR2和TLR4 siRNA干擾后有效地抑制HNE對腎素—血管緊張素系統(tǒng)的活化。
　　 總結:
　　 1、慢性腎衰促進脂肪組織腎素—血管緊張素系統(tǒng)(RAS)的活化;
　　 2、HNE可誘導脂肪細胞RAS的活化，并且此過程可能由TLR2和TLR4介導。
　　 第二部分內質網應激抑制劑對慢性腎衰脂肪組織脂質分解的影響
　　 研究背景:
　　 許多慢性

23、消耗性疾病常伴有蛋白質-能量消耗(PEW)和脂肪組織的減少。蛋白質-能量消耗(PEW)主要表現為體內蛋白質和脂肪儲存的減少，以營養(yǎng)不良和炎癥為特征，在進展性慢性腎病(CKD)中常存在，是CKD病人死亡率增加的重要危險因素。體內脂肪的丟失是CKD病人死亡率增加的一個獨立危險因素。脂肪細胞調節(jié)著能量平衡和機體脂肪組織的多少。脂質分解異常與人類多種疾病密切相關，如代謝綜合征、肥胖癥、胰島素抵抗、糖尿病、惡病質等。已有研究表明，慢性腎功能不全時

24、脂肪組織的脂質分解增加，導致脂質存儲和動員異常，但其具體機制尚待進一步研究。
　　 大量研究證實，內質網應激(ER stress)參與了人類多種慢性疾病的發(fā)生和發(fā)展，如慢性腎臟病、糖尿病、慢性炎癥等。內質網是蛋白合成的細胞器，低氧、低血糖、毒物等能干擾內質網的功能，引起內質網蛋白合成增加而致蛋白過度負荷或錯誤折疊，未折疊或錯誤折疊蛋白在內質網蓄積引發(fā)的未折疊蛋白反應(unfolded protein response)，統(tǒng)稱為內

25、質網應激。各種理化因素通過內質網上三個應激感知蛋白，即PEK樣內質網激酶(PKR-like ER kinase，PERK)、內質網應激轉導子IRE1(inositol-requiring kinase1)和內質網跨膜轉錄因子ATF6而啟動UPR反應。研究已發(fā)現，內質網應激可引起脂肪細胞的功能紊亂，如局部炎癥反應、胰島素抵抗及凋亡等。本實驗室已證實，慢性腎衰時主動脈上存在著內質網應激。那么，慢性腎功能不全時，脂肪組織是否也存在內質網應激及

26、內質網應激是否參與了脂肪組織脂質分解還需進一步研究。
　　 本實驗中，以5/6腎切除大鼠作為慢性腎功能衰竭模型，觀察慢性腎衰脂肪組織是否存在內質網應激;并應用內質網應激抑制劑PBA刺激慢性腎衰大鼠，觀察其脂質分解的變化情況，即探討慢性腎衰時脂肪組織脂質分解增強的機制。
　　 研究方法:
　　 一、二步法5/6腎切除建立慢性腎衰模型
　　 1)腹腔注射麻醉大鼠:給大鼠腹腔注射3％戊巴比妥鈉麻醉，俯臥位定于鼠

27、臺上。
　　 2)酒精消毒，于大鼠左腹部中1/3脊柱旁開2-3cm處行縱行切口，切口長度約為2-3cm。
　　 3)依次切開皮膚和皮下組織，并剪開肌肉暴露腎臟，剝離腎包膜，用無損傷血管鉗夾住腎蒂，切除腎臟的上下極約占左腎的2/3，明膠海綿壓緊上下極創(chuàng)面止血，放松血管鉗，觀察創(chuàng)面不再滲血后還納腎臟回腹腔，逐層縫合肌層及皮膚，酒精消毒手術切口?？p合前，腹腔內滴注青霉素注射液，預防感染。假手術組只做腎包膜剝離術。
　　

28、 4)一周后，在脊柱右側中1/3旁開2-3cm縱行切口（切口略高于左側），分離肌層，游離腎臟，無損傷血管鉗夾住腎蒂，4號絲線結扎腎蒂，切除右側腎臟，觀察有無出血，縫合肌層和皮膚，酒精消毒手術切口。假手術組只做腎包膜剝離術。
　　 二、內質網應激抑制劑PBA刺激大鼠
　　 在二期手術完成后的第12周，將慢性腎衰大鼠隨機分為三組，第一組不做任何處理，第二組灌PBS，第三組灌PBA(200mg/kg/d)，持續(xù)4周。大鼠處死前

29、一天，測量血壓。
　　 三、大鼠脂肪組織的提取及甘油的測定
　　 1)腹腔注射麻醉大鼠:給大鼠腹腔注射3％戊巴比妥鈉麻醉，仰臥位固定于鼠臺上
　　 2)腹主動脈采血后，采用放血法處死大鼠。
　　 3)酒精消毒皮膚，分離附睪和腹膜后脂肪墊（內臟脂肪）及腹股溝脂肪墊（皮下脂肪），迅速放入盛有1×PBS(PH7.4)的培養(yǎng)皿中，稱重。
　　 4) PBS反復清洗脂肪墊，剔除肉眼可見的血管，將脂肪墊剪成大

30、小約1-3mm2的脂肪塊，放入含2％無脂肪酸BSA的KRB磷酸鹽緩沖液中孵育5h，收集孵育液，3000g/min離心5min，測定甘油含量，以脂肪塊重量校正。
　　 四、皮下和內臟脂肪組織內質網應激指標GRP78、p-PERK/PERK、p-eIF2a/eIF2a、p-IRE1a/IRE1a蛋白活性的檢測
　　 Sham組、CRF組、CRF+Vehicle組和CRF+PBA組大鼠皮下和內臟脂肪組織，按組織重量:裂解液=1

31、:4的比例用勻漿器反復上下勻漿，以上操作均在冰上進行，勻漿完全后，13000g，4℃離心40min，去掉漂浮于上層的脂滴，提取中間層的勻漿液，即為脂肪組織的總蛋白，加入SDS(5×)上樣緩沖液，95℃煮沸蛋白，Western Blotting檢測皮下和內臟脂肪組織GRP78、p-PERK/PERK、p-eIF2a/eIF2a、p-IRE1a/IRE1a蛋白的活性。
　　 五、real-time PCR檢測皮下和內臟脂肪組織內質網

32、應激指標GRP78的表達
　　 Sham組、CRF組、CRF+Vehicle組和CRF+PBA組大鼠皮下和內臟脂肪組織液氮砸碎，按組織重量:TRIZOL=1:10的比例勻漿，提取組織RNA，逆轉錄，qRT-PCR檢測GRP78mRNA的表達。
　　 六、統(tǒng)計方法
　　 所有數據均代表3次以上重復實驗的結果，以均數±標準差表示，所有統(tǒng)計分析由統(tǒng)計軟件SPSS13.0完成。與常數項比較，采用單樣本t檢驗;方差齊的多個

33、樣本均數的比較采用One-Way ANOVA，兩兩比較采用LSD法;方差不齊的多個樣本均數的比較采用Welch法，兩兩比較采用Dunnett's T3法。p＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果:
　　 一、慢性腎衰大鼠模型的確立
　　 在二步法5/6腎切除術后的第16周測量各組大鼠的血壓并采血測定肌酐、尿素氮含量。術后第16周，CRF組收縮壓、平均動脈壓、血肌酐和尿素氮較Sham組均顯著升高(p＜0.05)

34、，而CRF組體重比Sham組減輕(p＜0.05)。CRF+PBA組的血肌酐和尿素氮與CRF+Vehicle組相比無明顯差異(p＞0.05)，但收縮壓和平均動脈壓較CRF+Vehicle組有所下降(p＜0.05)，而體重較CRF+Vehicle組升高(p＜0.05)
　　 二、PBA抑制慢性腎衰誘導的皮下和內臟脂肪的內質網應激
　　 1、慢性腎衰皮下脂肪內質網應激的表達情況
　　 (1)慢性腎衰皮下脂肪GRP78m

35、RNA的表達
　　 CRF組GRP78mRNA的表達與假手術組相比顯著增強(p＜0.05)。
　　 (2)慢性腎衰皮下脂肪GRP78蛋白的表達
　　 CRF組GRP78蛋白的表達與假手術組相比顯著增強(p＜0.05)。
　　 (3)慢性腎衰皮下脂肪eIF2α、PERK、IRE1α的活化情況
　　 CRF組的p-eIF2α、p-PERK、p-IRE1α的活性與假手術組相比顯著增強(p＜0.05)。e

36、IF2α、PERK、IRE1α總蛋白無變化。
　　 2、PBA抑制慢性腎衰皮下脂肪內質網應激的活化
　　 (1) PBA抑制慢性腎衰皮下脂肪GRP78mRNA的表達
　　 CRF+PBA組GRP78mRNA的表達與CRF+Vehicle組相比顯著減弱(p＜0.05)。
　　 (2) PBA抑制慢性腎衰皮下脂肪GRP78蛋白的表達
　　 CRF+PBA組GRP78蛋白的表達與CRF+Vehicle組

37、相比顯著減弱(p＜0.05)。
　　 (3) PBA抑制慢性腎衰皮下脂肪eIF2α、PERK、IRE1α的活化
　　 CRF+PBA組的p-eIF2α、p-PERK、p-IRE1α的活性與CRF+Vehicle組相比顯著減弱(p＜0.05)。eIF2α、PERK、IRE1α總蛋白無變化。
　　 3、慢性腎衰內臟脂肪內質網應激的表達情況
　　 (1)慢性腎衰內臟脂肪GRP78mRNA的表達
　　 C

38、RF組GRP78mRNA的表達與假手術組相比顯著增強(p＜0.05)。
　　 (2)慢性腎衰內臟脂肪GRP78蛋白的表達
　　 CRF組GRP78蛋白的表達與假手術組相比顯著增強(p＜0.05)。
　　 (3)慢性腎衰內臟脂肪eIF2α、PERK、IRE1α的活化情況
　　 CRF組的p-eIF2α、p-PERK、p-IRE1α的活性與假手術組相比顯著增強(p＜0.05)。eIF2α、PERK、IRE1α

39、總蛋白無變化。
　　 4、PBA抑制慢性腎衰內臟脂肪內質網應激的活化
　　 (1) PBA抑制慢性腎衰內臟脂肪GRP78mRNA的表達
　　 CRF+PBA組GRP78mRNA的表達與CRF+Vehicle組相比顯著減弱(p＜0.05)。
　　 (2) PBA抑制慢性腎衰內臟脂肪GRP78蛋白的表達
　　 CRF+PBA組GRP78蛋白的表達與CRF+Vehicle組相比顯著減弱(p＜0.05)。

40、
　　 (3) PBA抑制慢性腎衰內臟脂肪eIF2α、PERK、IRE1α的活化
　　 CRF+PBA組的p-eIF2α、p-PERK、p-IRE1α的活性與CRF+Vehicle組相比顯著減弱(p＜0.05)。eIF2α、PERK、IRE1α總蛋白無變化。
　　 三、PBA抑制慢性腎衰血中脂質分解指標的升高
　　 5/6腎切除后的第16周，采血，測定血中甘油三酯和甘油的水平，發(fā)現CRF組血甘油三酯和甘油

41、水平與假手術組相比顯著升高(p＜0.01)，而CRF+PBA組血甘油三酯和甘油水平與CRF+Vehicle組相比有所下降(p＜0.01)。
　　 四、PBA抑制慢性腎衰皮下和內臟脂肪脂質分解的升高
　　 1、慢性腎衰皮下和內臟脂肪甘油含量增加
　　 (1) CRF組皮下脂肪甘油釋放量與假手術組相比顯著升高(p＜0.05)。
　　 (2) CRF組內臟脂肪甘油釋放量與假手術組相比顯著升高(p＜0.05)。<

42、br>　　 2、PBA抑制慢性腎衰皮下和內臟脂肪甘油含量的增加
　　 (1) CRF+PBA組皮下脂肪甘油釋放量與CRF+Vehicle組相比有所下降(p＜0.05)。
　　 (2) CRF+PBA組內臟脂肪甘油釋放量與CRF+Vehicle組相比有所下降(p＜0.05)。
　　 結論:
　　 1、慢性腎衰皮下和內臟脂肪存在內質網應激
　　 2、內質網應激抑制劑可部分抑制慢性腎衰脂肪組織的脂質分