樹(shù)豆葉藥用提取物的急性和亞急性毒性及質(zhì)控方法研究.pdf

1、樹(shù)豆[Cajanus cajan(Linn.) Millsp.]是一種豆科植物，分布于亞洲、非洲和美洲等地區(qū)，其葉被廣泛用作飼料和傳統(tǒng)藥物。然而，關(guān)于樹(shù)豆葉及其提取物的系統(tǒng)的安全性評(píng)價(jià)尚未見(jiàn)報(bào)道。
　　目的:
　　1、對(duì)樹(shù)豆葉水提取物(WEC)、90％乙醇提取物(EEC)，以及EEC的二氯甲烷可溶部位(DEC)和正丁醇可溶部位(BEC)中的活性成分進(jìn)行含量測(cè)定，為樹(shù)豆葉藥用提取物的毒理學(xué)研究對(duì)象提供質(zhì)量保障。
　　2、

2、研究口服WEC、EEC、DEC和BEC對(duì)昆明小鼠的急性毒性;口服WEC和EEC對(duì)SD大鼠的亞急性毒性;為樹(shù)豆葉特別是其藥用提取物的開(kāi)發(fā)提供安全性評(píng)價(jià)依據(jù)。
　　方法:
　　1、質(zhì)量分析試驗(yàn)采用高效液相色譜法對(duì)各提取物中的特征性黃酮和蔗類成分進(jìn)行質(zhì)量分析。對(duì)WEC和BEC中的葒草素(orientin)、牡荊苷(vitexin)、染料木苷(genistein)以及EEC和DEC中的球松素(pinostrobin)、木豆素C(lo

3、ngistyline C)、木豆素A(longistyline A)的含量進(jìn)行測(cè)定。
　　2、毒理學(xué)試驗(yàn)急性毒性試驗(yàn):采用最大耐受量法，單次口服WEC、EEC、BEC和DEC最大劑量后，連續(xù)14天觀察小鼠的死亡率、體重變化、一般狀態(tài)和毒性反應(yīng)，求得最大耐受量(MTD)。
　　亞急性毒性試驗(yàn):水提取物組(WEC)和乙醇提取物(EEC)均以6.0、3.0、1.5g·kg-1不同劑量給予SD大鼠連續(xù)灌服4周。在給藥4周和停藥2周后

4、分別觀察大鼠的體重、臨床體征、血液學(xué)和生化指標(biāo)、相對(duì)臟器重量和組織病理學(xué)檢查結(jié)果。
　　結(jié)果:
　　1、HPLC檢測(cè)結(jié)果表明，WEC和BEC的特征性成分染料木苷、牡荊苷和葒草素的含量范圍分別為0.25％-0.78％(WEC)和0.51％-2.98％(BEC);EEC和DEC特征性成分木豆素A、木豆素C和球松素的含量范圍分別為0.22％-1.06％(EEC)和1.80％-7.34％(DEC)。
　　2、在急性毒性試驗(yàn)中，

5、未觀察到動(dòng)物死亡和一般行為、呼吸模式、自主運(yùn)動(dòng)、反射、毛發(fā)等異常變化。WEC、EEC、BEC和DEC的MTD分別為15.0、15.0、15.0、11.3g·kg-1（折算成生藥分別為115.4g·kg-1、65.2g·kg-1、862.1g·kg-1、283.2g·kg-1）。急性和亞急性毒性試驗(yàn)所有組動(dòng)物的體重呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，在亞急性毒性研究中，試驗(yàn)組動(dòng)物的血液學(xué)、生化參數(shù)和病理組織學(xué)檢查結(jié)果與對(duì)照組比較無(wú)明顯差異，然而，WEC中劑量組和

6、EEC高、中劑量組雌性大鼠的腎體系數(shù)高于對(duì)照組(P＜0.05);與對(duì)照組比較，EEC三個(gè)劑量組雄性大鼠的睪丸和附睪體系數(shù)有著顯著降低(P＜0.01或P＜0.001)，但在2周停藥期結(jié)束后，以上異常變化均恢復(fù)至正常水平，且未觀察到血液學(xué)、血清生化和病理組織學(xué)的異常變化。
　　結(jié)論:
　　樹(shù)豆葉水提取物、乙醇提取物、二氯甲烷提取物和正丁醇提取物在本實(shí)驗(yàn)條件下未顯示出急性毒性;在亞急性毒性試驗(yàn)劑量條件下，WEC和EEC口服給藥4周