胸腔內(nèi)藥物注射對(duì)裸鼠惡性胸腔積液治療作用的研究.pdf

1、目的:
　　探討胸腔內(nèi)注射重組人內(nèi)皮抑素、順鉑、重組人內(nèi)皮抑素聯(lián)合順鉑對(duì)裸鼠惡性胸腔積液的治療作用。
　　方法:
　　①利用經(jīng)典胸膜腔內(nèi)注射的造模方法，BALB/c裸鼠胸膜腔內(nèi)注射Lewis Lung Cancer(LLC)細(xì)胞構(gòu)建裸鼠惡性胸腔積液(malignant pleural effusion，MPE)模型，通過影像學(xué)、胸水量觀察、胸膜/肺形態(tài)改變及胸膜病理確定造模成功。
　?、谠炷５谌鞂?0只裸鼠隨機(jī)

2、分為4組，重組人內(nèi)皮抑素組(E)、順鉑組(P)、重組人內(nèi)皮抑素聯(lián)合順鉑組(EP)以及生理鹽水對(duì)照組(NS)，造模第14天分組分別胸腔內(nèi)局部注射重組人內(nèi)皮抑素、順鉑、重組人內(nèi)皮抑素聯(lián)合順鉑以及生理鹽水，3天后處死裸鼠，分析各組裸鼠胸腔積液量、胸膜腫瘤微血管密度(Meanblood vessel density，MVD)以及血管生成、細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　?、俨捎媒?jīng)典方法，裸鼠胸腔內(nèi)注射LLC細(xì)胞可構(gòu)建MPE模

3、型，注射第14天成模率為50％，胸膜腔內(nèi)注射的造模方法安全穩(wěn)定。
　?、诼闶驧PE造模第14天，各組裸鼠胸腔內(nèi)分別連續(xù)3天注射重組人內(nèi)皮抑素、順鉑、重組人內(nèi)皮抑素聯(lián)合順鉑以及生理鹽水，第三天注射24h后，處死裸鼠計(jì)算各組胸腔積液的量，各組治療后胸腔積液量均值及標(biāo)準(zhǔn)差分別為:E組271.8±133.8ul;P組447.4±75.3ul; EP組247.7、2±89.2ul;NS組503.2±146.6ul。E組以及EP組對(duì)比NS組，

4、胸水量顯著下降，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，p＜0.05。P組與NS組差別沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　?、勖庖呓M化顯示，四組MVD均值和標(biāo)準(zhǔn)差分別為:E組10.2±2.3，P組27.7±4.6，EP組11.7±1.9，NS組28.3±4。對(duì)比NS組，E組及EP組的MVD顯著下降，p＜0.05，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;P組MVD的差別無顯著差異;E組對(duì)比P組，MVD下降，p＜0.05，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。線性回歸分析提示裸鼠MPE量和MVD呈正相關(guān)，相關(guān)系

5、數(shù)R=0.71。
　?、苎苌上嚓P(guān)基因RT-PCR分析提示，重組人內(nèi)皮抑素可下調(diào)胸膜轉(zhuǎn)移腫瘤血管表皮生長(zhǎng)因子-a（Vescular epidermal growthfactor-a，VEGF-α）的基因表達(dá)。對(duì)比NS組，E組、EP組VEGF-α表達(dá)均下降，p＜0.05，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;P組VEGF-α表達(dá)無差異，p=0.9496;E組對(duì)比P組，VEGF-α表達(dá)顯著下降，p＜0.05，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但同時(shí)另一血管生成因子

6、缺氧誘導(dǎo)因子1-α(Hypoxia induced factor1-α，HIF1-α)，在E組及EP組中表達(dá)升高，p＜0.05;而P組HIF1-α表達(dá)的差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　⑤凋亡相關(guān)基因RT-PCR分析提示，對(duì)比E組及NS組，順鉑可上調(diào)P組Bax基因的表達(dá)，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，p＜0.05;而各組Bcl-2基因表達(dá)差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:
　　①胸腔內(nèi)注射LLC細(xì)胞可成功制作裸鼠MPE模型。
　　②重組