益腸平對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎治療作用的實(shí)驗(yàn)性研究.pdf

1、目的益腸平(YCP)是一種民間治療潰瘍性結(jié)腸炎(UC)有一定療效的中藥復(fù)方。為了進(jìn)一步驗(yàn)證其對(duì)UC的治療作用，本課題采用與臨床UC發(fā)病機(jī)制相近的實(shí)驗(yàn)性UC模型加以評(píng)估，并初步探討其作用機(jī)制。 方法分別采用2％葡聚糖硫酸鈉(Dss)和乙酸法建立小鼠UC模型。設(shè)立空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、柳氮磺吡啶(SASP,200mg·kg-1·d-1)治療組、益腸平高(YCPl，30．8mg·kg-1·d-1)、中(YCP2，15．4mg·kg-

2、1·d-1)、低(YCP3，7．7mg·kg-1·d-1)劑量組，每組12只。模型對(duì)照組和空白對(duì)照組給予等量蒸餾水。(1)計(jì)算小鼠疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)和結(jié)腸潰瘍及炎癥評(píng)分(MSCA)，測(cè)定外周血白細(xì)胞總數(shù)(TWBC)、中性粒細(xì)胞百分比(N％)；(2)伊文思蘭法測(cè)定結(jié)腸粘膜通透性；免疫組化法測(cè)定結(jié)腸iNOS、NF-KbP65；黃嘌呤氧化法和硫代巴比妥酸(TAB)法測(cè)定結(jié)腸組織勻漿SOD及MDA活性：ELISA法測(cè)定血漿TNF-a；(3)

3、測(cè)定小鼠益腸平最大耐受量(MTD)。 結(jié)果1、DAI和MSCA評(píng)分：空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、SASP治療組、YCPl、YCP2、YCP3組平均DAl分別為0．00±0．00、6．33±2．90、3．16±1．75、1．42+0．90、3．67±3．26、4．50±2．32。與模型對(duì)照組比較，SASP治療組(P=0．004)、YCPl(P=0．000)、YCP2(P=0．033)組的DAI明顯降低，但YCP3組DAI與模型對(duì)照組的

4、差異無(wú)顯著性意義(P=0J92)：SASP治療組的DAI與YCPI(P=0．005)、YCP2(P=0．644)、YCP3(P=0．126)組比較差異無(wú)顯著性。各組平均結(jié)腸潰瘍及炎癥評(píng)分依次為：0．00±0．00、6．58±3．15、2．50+1．88、1．42±1．68、1．83±1．53、3．58±1．44。與模型對(duì)照組比較，SASP治療組(P=0．001)、YCPl(P=0．000)、YCP2(P=0．000)、YCP3(P=0．

5、003)組的評(píng)分均降低；SASP治療組與YCPl(P=0．151)、YCP2(P=0．351)、YCP3(P=O．128)組比較差異無(wú)顯著性。 2、TWBC(×103／mm3)和N％變化(括號(hào)內(nèi)數(shù)值為N％)：上述各組依次為：58．13±11.3l(10．75％±3．22％)、163．96±61．43(52．25％4-5．07％)、119．10±33．08(29．08％±13．30％)、107．65±21．37(9．58％±2．9

6、0％)、111．65±16．18(12．67％±4．36％)、129．37±12．58(25．33％4--9．07％)。與模型對(duì)照組比較，SASP治療組、YCPl、YCP2、YCP3組的TWBC和N％均較低(P<0．05)。SASP治療組的TWBC與YCPl(P=0．324)、YCP2(P=0．490)、YCP3(P=0．326)組比較差異無(wú)顯著性。SASP治療組的N％與YCPl(P=0．000)、YCP2(P=0．001)組差異有顯著

7、性，但與YCP3組的差異無(wú)顯著性=0．428)。 3、小鼠腸通透性(μg／mg)：空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、SASP治療組、YCPl、YCP2、YCP3組分別為：5．86±1．48、22．32±15．12、9．504-8．47、9．35±3．65、12．10±2．16、18．97±6．65。與模型對(duì)照組比較，SASP治療組(P=0．002)、YCPl(P=0．007)、YCP2(P=0．039)腸道通透性相對(duì)降低，但YCP3組與模

8、型對(duì)照組的差異無(wú)顯著性意義(P=0．742)。SASP治療組與YCPl(P=0．963)、YCP2(P=0．427)、YCP3(P=0．054)組比較差異無(wú)顯著性。 4、免疫組化：空白對(duì)照組、UC模型對(duì)照組、SASP治療組、YCPl、YCP2、YCP3組結(jié)腸iNOS(陽(yáng)性單位)表達(dá)分別為：2．13±0．56、31．27±5．22、16．13±3．78、15．69±3．05、20．89±4．65、22．57±4．88。與模型對(duì)照組

9、比較，SASP治療組(P=0．000)、YCPl(P=0．000)、YCP2(P=0．000)、YCP3(P=0．000)iNOS陽(yáng)性表達(dá)單位均降低。SASP治療組與YCPl(P=0．760)差異無(wú)顯著性，與YCP2(P=0．012)、YCP3(P=0．001)組比較差異有顯著性。 各組小鼠結(jié)腸NF—KbP65(陽(yáng)性細(xì)胞％)依次為：0．83±0．45、27．89±8．96、16·12±7．73、16．23±5．88、17．74±

10、8．11、23．25±8．76。與模型對(duì)照組比較，SASP治療組(P=0．002)、YCPl(P=0．003)、YCP2(P=0．009)組的表達(dá)水平均降低，但YCP3組與模型對(duì)照組的差異無(wú)顯著性意義(P=0．360)。SASP治療組與YCPl(P=0．972)、YCP2(P=0．624)組比較差異無(wú)顯著性，與YCP3(P=0．046)組比較差異有顯著性。 5、結(jié)腸SOD和MI)A：各組小鼠結(jié)腸組織勻漿SOD(U／mL)活性依次

11、為：78．46±11．68、47．11±9．24、67．29±5．00、70．47±10．80、66．37±13．95、65．21±6．43。與模型對(duì)照組比較，SASP治療組(P=0．000)、YCPl(P=0．000)、YCP2(P=0．000)、YCP3(P=0．000)組的SOD水平顯著升高。SASP治療組SOD與YCPl(P=0．366)、YCP2(P=0．832)、YCP3(P=0．386)組比較差異無(wú)顯著性。 各組小

12、鼠結(jié)腸組織勻漿MDA(nmol／mgprot)含量依次是：0．604-0．1l、0．9l±0．22、O．70±0．22、0．56±0．18、0．71±0．20、0．81±0．26。與模型對(duì)照組比較，SASP治療組(P=0．036)、YCPl(P=0．000)和YCP2(P=0．040)組的MDA水平較低，但YCP3組與模型對(duì)照組的差異無(wú)顯著性意義(P=0．061)。SASP治療組MDA與YCPl(P=0．043)組比較差異有顯著性，與Y

13、CP2(P=0．654)、YCP3(P=0．817)組比較差異無(wú)顯著性。 6、血漿TNF—Q：各組小鼠血漿TNF-α含量(pg/mL)依次為：6．25±6．77、93．75±25．11、65．10±21．02、45．83±28．43、70．3l±24．06、81．77±22．48。與模型對(duì)照組比較，SASP治療組(P=0．011)、YCPl(P=0．000)、YCP2(P=0．048)組的水平較低，而YCP3組與模型對(duì)照組無(wú)顯著