穗醋栗再生體系的建立.pdf

1、本文以‘寒豐’、‘早生黑’、‘紅瑞’、‘密穗’、‘黑金星’和‘大粒甜’為實驗試材，對快繁過程中的初代培養(yǎng)、芽的增殖、壯苗培育、愈傷組織誘導及不定芽的誘導五個部分的相關(guān)問題進行了詳細研究。本試驗建立了‘寒豐’、‘早生黑’、‘紅瑞’、‘密穗’、‘黑金星’和‘大粒甜’品種組培無性系，為今后進一步開展生物技術(shù)研究奠定了基礎(chǔ)。主要得出以下幾個結(jié)論： 1.剪取穗醋栗一年生健壯枝條，經(jīng)低溫沙藏解除休眠后進行水培。以水培抽生的新梢為外植體，用含

2、有0.1％的升汞水溶液浸泡5分鐘，其接種的成活率較高，可到達80％。接種時所用的初代培養(yǎng)基的種類不同，苗的質(zhì)量也不相同。以1/2MS+IBA1.0mg/L-1為培養(yǎng)基，培育出組培苗的莖粗和株高極顯著于MS+6-BA1.0mg/L-1+IBA0.1mg/L-1處理培育出的植株，植株生長健壯。 2.在進行穗醋栗的增殖培養(yǎng)過程中，BA1.0mg/L-1+IBA0.1-0.2mg/L-1+MS配方是最簡便，培養(yǎng)效果也最為理想?！S’和

3、‘早生黑’芽的增殖倍數(shù)可達到4倍。 3.對比幾種配方的生根效果，其中生根效果最好的是1/2MS+IBA1.0mg/L-1生根率達到100％。植株生長旺盛，葉片濃綠，葉片大且平整，有利于植株光合作用的進行從而儲存有機物。植株節(jié)間明顯繼代操作簡便。根系分枝多，根級指數(shù)可達到4級，吸收根多，易于吸收水分和養(yǎng)分。生根的天數(shù)控制在30天左右為宜，生根生長時間過長苗的木質(zhì)化程度越大，影響苗的繼代成活率。 4.穗醋栗組培苗，經(jīng)增殖培養(yǎng)

4、后呈叢狀，無節(jié)間，且分離較困難。本試驗采取交替式培養(yǎng)方法，采用MS+BA1.0mg/L-1和1/2MS+IBA1.0mg/L-1兩種培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，減少了分離操作上的不便。同時很大程度的避免了同種激素在植物體內(nèi)的大量殘留造成的抑制作用。從株高和莖粗等方面的考察與單純進行分化培養(yǎng)的植株呈極顯著差異。 5.營養(yǎng)器官中SOD與POD含量的多少，標志著其代謝活性的強弱。側(cè)面也表明了植株營養(yǎng)器官脫分化的能力。試驗測得穗醋栗營養(yǎng)器官SOD與

5、POD含量由多到少以此為葉>葉柄>根>莖而且含量差異均呈及顯著差異。穗醋栗器官脫分化的能力較弱，因此試驗采取兩步誘導，將穗醋栗的葉柄首先培養(yǎng)在MS+BA1.0mg/L-1+2、4-D1.0mg/L-1培養(yǎng)基上，15天后轉(zhuǎn)接到MS+BA1.0mg/L-1+NAA0.4mg/L-1+AC1.0g+AgNO31.0mg/L-1培養(yǎng)基上得到綠色較大體積的愈傷組織。穗醋栗愈傷組織褐化現(xiàn)象較嚴重，從細胞學角度觀察發(fā)現(xiàn)褐色愈傷組織多數(shù)無細胞核，細胞質(zhì)